Bepaling van pyrimethamine in mengvoeders

(1)

Afd. Diergeneesmiddelen 1981-11-10 Verslag 81.86 pr.nr. 505.2090 Onderwerp: Bepaline van pyrimethamine in

mengvoeders.

Bijlagen: 2.

Voorgaand verslag: 81.31.

Verzendlijst: direkteur, direktie VKA, sektorhoofd (3x), afd. Dierge-neesmiddelen, afd. normalisatie (Humme), projektbeheer, dhr Hallman

(2)

Afdeling Diergeneesmiddelen Datum: 1981-11-10

VERSLAG 81.86 Pr.nr. 505.2090

Projekt: Normalisatie/harmonisatie van onderzoekmethoden voor dier-voeders.

Ondeno1erp: Bepaling van pyrimethamine in mengvoeders.

Bijlagen: 2

Voorgaand verslag: 81.31

Doel:

EEG-ringtest.

Bepaling van pyrimethamine in mengvoeders.

Samenvatting:

De monsters, gezonden door ISS Rome, 1o1erden onderzocht volgens de methode zoals beschreven staat in EEG-document 807/VI/80 - Rev. september 1981.

Conclusie:

De beschreven methode voldoet niet geheel.

Bovendien is de bepaling te bewerkelijk om als routinebepaling te ge-bruiken.

Verant1wordelijk: drs F.G. Buizer

~

Mede1o1erker /samensteller: M. A. Visser-Meijer

\V

(3)

Inleiding:

Bij de voorgaande ringtest werd het mengvoederextract gereinigd over een aluminiumoxide kolom.

Omdat de activiteit van de kolom nogal kritisch was, werden grote ver -schillen in waarden gevonden.

De nu voorgestelde zuivering omvat een vloeistof-vloeistof extractie.

Methode volgens doe. 807/VI/80 - Rev. september 1981

Pyrimethamine lvord t uit het voeder geëxtraheerd met ammoniakale metha-nol. Een aliquot deel van de gefiltreerde extractoplossing wordt ge-zuiverd door verdeling tussen chloroform en 2N 1•18terig HCl. Vervolgens 1mrdt de waterige fase alkalisch gemaakt met geconcentreerde ammonia, waarna deze fase geëxtraheerd wordt met ethylacetaat. De organische fase wordt drooggedampt, de gezuiverde pyrimethamine opgelost in een bepaald volume methanol en bepaald m.b.v. HPLC.

Toepassingsgebied

De methode is geschikt voor de bepaling van pyrimethamine in mengvoe-ders. De detectiegrens ligt bij 1 mg/kg.

Storingen

De methode wordt niet gestoord door ethopabaat, sulfachinoxaline en amprolium.

Resultaten

De resultaten staan vermeld in bijlage I.

Chromatagrammen van standaard pyrimethamine, blanco voeder en voeder dat pyrimethamine bevat staan afgebeeld in bijlage II.

Opmerkingen

Volgens het voorschrift moet bij de extractie van de zuurlaag met chloroform en van de alkalische laag met ethylacetaat krachtig ge-schud worden. Dit leverde echter sterke emulsies op die pas na toe-voeging van zeer veel vast NaCl verdwenen.

Om deze emulsies te voorkomen is daarom in alle gevallen slechts zacht-jes geschud.

(4)

- 2

-Dit heeft waarschijnlijk geleid tot verschillen in de recovery en in de gevonden 1o1aarden. Bij de laatste stap in de zuivering van het ex-tract werd een complete scheiding eerst verkregen door de fase een

nacht te laten scheiden.

Conclusie

De beschreven methode voldoet niet geheel.

Bovendien is de bepaling te bewerkelijk om als routinebepaling te ge

-bruiken.

(5)

Bijlage I. Gehalte pyrimethamine in mengvoeders, uitgedrukt in mg/kg Blanco meel Heel Pellets niet aantoonbaar 4,0 3,2 niet aantoonbaar 3,9 (recovery 90%) 2,2 (recovery 57%)

Vanuit het Istituto Superiore di Sanita is ons in Brussel meegedeeld

(6)

f,.fèl~~r'c('

..

.

L· .. I I • i ! ' 1 , , 1 ···~··· "''J' •r

--

-.

--

-

-,--

-i ---:-+---~

- --- -

-I : ! ___ r.,::___ _ _ _ ~ · -!

I

' I, I

__

-

____

;__ ___

,

_

·---·-;--~- ,---~· -! i 0 . I I I • i--~---;

__

~ I

I

-J _.

___

__;

__

.L

I

-

.

-

---.~...

___

-- -1 I (' I

---

-· -~=..:; _

I

-

· ,

i I l

I

~: "I I i

i

I .-I ··-ï -' ,.-. ,· ·---:---- - -- ·--- --, I ,.

.

i

.~

I

I ' ! f _J .J_ - - _. _ _ L_ I I

1

· I

I '

I

:J

f · _ _J__ I I I ~ _·I~ -:::::.

-1--:

- -- - - ' - - - -1 i -I I I 1

rt-;

. ' I _ _I - l

,

-

- i

J

I I I • T I - I

:

--1

--

-

---

. - - - -

-

---

-

- -

---

___ ! _• _ ___:_;__ - t -~-

_.

--- -- -· 1·

--

,

I ·-i i I I :; I l ! _j-~---·-- ..___~ . -- f

-f--j

:

=-

!

.

I .

.

'

J

_I

-

-n

~

_:

-

. -:

_I _.

,l

0 :

--

-:

1

l

-~:

I ,

:-

0 • I ' I I , I ''·i I I _ _

I

_

- - __ I_

.

=· :-

.

:·

i . .

I

6\~V\

.

·t-ol-· -· ~-· ~ r-·· "--~ ..

:-

-:·

-

r

'

.. -· ..

! ... · .. --.,_. ... ·~·,·~ ·

l

•ne

eL · . -_ · ·

!

·

· ·---·---

---.--

-

~

---i

-

_,_

· -'--

- -

·

' '

_.

_--

· ---

-~---

:=-

-_

~

..

_:_L_-::_:_· _ _ - : -- -- -- ---_-;---- ---- -'

-

-=

t · -- - - -- -_ _ j _ ___ __

--' ---

-- ---=--=-

.

__

_;_-i-_

--1-

__

, _ _1:-

~

_ _:_.=_ _ _:.:_:_ _ __

l=----. ,_. ,_ I

J

_j I ,

....

.

,

..

.

, .... ·-

...

I

-I

· _

e

u

er5

'----

f

~-;~

7 ,,: ... . , ••

~.~.

r

:;.-:

.

,~

1 ~

-:J

~

:~''

··.

;

..

:

~

! =~-:::::-:-:::'--: -::-.:-~ :-~·--·

-

· .

"·:

I

:

.-

~ ~ -~:-_-:

-

;

=--

:

.

: :

_! -~r--

_:

_

i

~Sc~~~

'[:~

~~

i

·:

:

~-

~-:-

~

--

-

~,

1 •

:

~·;

=·

i~

~~-J:':

:

:2~2

f

~

2 L I' •

I

-

t

,--~~-:c_:=~

{

~

'_;:··

~

I

.

.•

t·-

:

:_:

· ~

r~

K~

î

~':~

·t

~I ~:

i

I

.i

• :-

~

_-1

-_

-

~

-~

t

~

:

-~--~-~-:--

---

:--~

I - :-

-~-~

~

~~:

'

'Cc_

r

~ ~ :~~

c

~~ ~-

_c·

!

~~

-,;-

.

. - - --,- -- - . - --- . !

. -

i

·=.

-:::

~::,:-.- -~:. I

-

~ -=~= ~~

--

-

1 ~=~~

-

r~

=--

;_=-~

~

~~

:=

- l - - - - - ---·- -.

-

~- --'

-

-- _._.- - j

·-

- _-

.

_.

--=--

_--

-

__

=-r-,

--

_, _

--

_____

· -

- ·--- -1 - +- - - ·-

~-=-

!

~--=---=

<_

--=:

:--:y---r-=--

i---·~=-

_

,

! l -- . -1 t: .. : ~ i _ ___j__--'----1

_

;j

_~~;~--

-j --:._ j - - - --

I

-

> r• ' · _

_:_~~~

'-:::t----:

_

:_:

~

-.: ; -.. :-:..: -

-~

:

--= _:

j

-

~-~

-

D j -

-:

_,-=----~---=1=-::.r-1 =-g,

· ··

-

--=

:

_

~~-

_

:

__

_