7.1 Immuno-Magnetic Separation
De optimalisatie van de IMS methode is grotendeels volbracht. De kosten zijn verlaagt, er zijn nu minder beads per monster nodig. Ook is IMS methode getest met verschillende zenuwgassen, naast Sarin is de IMS methode ook gebruikt voor monsters die waren geremd met VX, Soman of met de biotine-OP. Een vervolgonderzoek voor de IMS methode zou zijn op basis van kwantiteit. Dit is nu eenmaal uitgevoerd, maar zal meerdere keren moeten worden uitgevoerd voor een betrouwbaar resultaat.
7.2 Snelle diagnose: gebruik van biotine-OP
Bij de snelle diagnose methode werkt de biotine-OP niet naar behoren. Een vervolgonderzoek zou kunnen zijn het verder optimaliseren van de snelle diagnose methode en de biotine-OP zelf. Het is voornamelijk van belang dat er duidelijkheid komt over de remming van de biotine-OP. Daarnaast is het ook mogelijk om naar een ander middel te zoeken met hetzelfde principe. Oftewel een middel zoals de biotine-OP die ervoor zorgt dat ongeremde HuBuChE geremd wordt of hiermee selectief reageert en verwijderd kan worden uit het monster.
7.3 Naremmen
Het naremmen van geremde plasma monsters kan een indicatie geven over het percentage remming van een persoon. Door het nog vrije aanwezige HuBuChE in plasma monsters na te remmen met een bekend organofosfaat ontstaat een 100% remming. Doordat het nageremde organofosfaat bekend is, kan het percentage van de organofosfaat waarmee de persoon geremd is worden bepaald met behulp van een ijklijn. De informatie die verschaft wordt kan gebruikt worden om een behandeling te bepalen die nuttig is voor de desbetreffende persoon.
7.4 Controle opslag biologische monsters
In de praktijk zal een plasma en/of volbloed monster niet direct na remming met een organofosfaat in de koelkast of in de vriezer belanden. Hier kunnen een aantal uren/dagen tussen zitten. Om een realistisch beeld te krijgen over de opslagcondities zal er een vervolgonderzoek moeten plaats vinden met onder andere ook kamertemperatuur als opslagtemperatuur, tijdelijk of in z’n geheel. Ter kwantificatie van de monsters is het ook belangrijk dat er in vervolgonderzoek een interne standaard wordt toegevoegd, zodat er een doorslaggevend resultaat kan worden verkregen na analyse van de monsters. Daarnaast is het belangrijk om voor het invriezen van volbloed de monsters te centrifugeren, zodat plasma en bloedcellen gescheiden worden. Hierdoor kan zelfs na invriezen nog het plasma gebruikt worden voor analyse.
Pagina | 41
Literatuurlijst
[1] Introductieboek CBRN Protection Geraadpleegd op 26 februari 2014 [2] TNO City Intranet (interne website)
Onderwerp: Organisatie Geraadpleegd op 26-02-2014 [3] Originele site van TNO
Beschikbaar via: www.tno.nl Geraadpleegd op 26 februari 2014
[4] Gupta RC. Handbook of toxicology of chemical warfare agents. Londen: Academic Press, 2009.
[5] Morgan S, Morgan A. Moderne oorlogsvoering. Leidschendam: Biblion Uitgeverij: 2005. p. 14-15.
[6] Originele site van Organisation for the Prohibition of Chemical Weapons. Beschikbaar via: www.opcw.org
Geraadpleegd op 24 februari 2014
[7] Sidell FR. Riot control agents. In: Sidell FR, Takafuji ET, Franz DR, editors. Medical aspects of chemical and biological warfare. USA: TMM Publications; 1997. p. 308
[8] Delfino RT, Ribeiro TS, Figueroa-Villar JS. Organophosphorus compounds as chemical warfare agents: a review. Journal of the Brazillian Chemical Society 2009, 20(3): 407-420.
[9] Ramano JA, Luckey BJ, Salem H. Chemical warfare agents: chemistry, pharmacology, toxicology and therapeutics. Boca Raton: CRC Press, 2008.
[10] Katagi M, Tatsuno M, Nishikawa M, Tsuchihashi H. On-line solid-phase extraction liquid chromatography-continuous flow frit fast atom bombardment mass spectrometric and tandem mass spectrometric determination of hydrolysis products of nerve agents alkyl methylphosphonic acids by p-bromophenacyl derivatization. Journal of Chromatography A 1999, 833(2): 169-179.
[11] Dvir H, Silman I, Harel M, Rosenberry TL, Sussman JL. Acetylcholinesterase: From 3D structure to function. Chemico-Biological Interactions 2010, 187(2010): 10-22.
[12] Samenwerkende Enzymen. In: Dressler D, Potter H. Enzymen, gangmakers in de natuur. Maastricht/Brussel: Natuur & Techniek; 1992. p. 227-250.
[13] Johnson G, Moore SW. Why has butyrylcholinesterase been retained? Structural and
functional diversification in a duplicated gene. Neurochemistry International 2012, 61(2012): 783-797.
[14] Masson P, Lockridge O. Butyrylcholinesterase for protection from organophosphorus poisons: catalytic complexities and hysteric behavior. Archives of Biochemistry and Biophysics 2010, 494(2): 107-120.
Pagina | 42 [15] van der Schans MJ, Fidder A, van Oeveren D, Hulst AG, Noort D. Verification of exposure to
cholinesterase inhibitors: generic detection of OPCW schedule 1 nerve agent adducts to human butyrylcholinesterase. Journal of Analytical Toxicology 2008, 32(2008): 125-130. [16] Noort D, van der Schans MJ, Benschop HP. Biomonitoring of exposure to chemical warfare
agents. In: Dishovsky C, Pivovarov A, Benschop H, editors. Medical treatment of intoxicants and decontamination of chemical agent in the area of terrorist attack. Dordrecht: Springer; 2006. p. 21-26.
[17] Noort D, Black RM. Methods for retrospective detection of exposure to toxic scheduled chemicals. Part B: Mass Spectrometric and Immunochemical Analysis of covalent adducts to proteins and DNA. Encyclopedia of Analytical Chemistry 2006 – 2012 John Wiley & Sons, Ltd. [18] Ellman GL, Courtney KD, Andres V, Featherstone RM. A new and rapid colorimetric
determination of acetylcholinesterase activity. Biochemical Pharmacology 1961, 7(2): 88-90. [19] Sporty JLS, Lemire SW, Jakubowski EM, Renner JA, Evans RA, Williams RF, et al.
Immunomagnetic separation and quantification of butyrylcholinesterase nerve agent adducts in human serum. Analytical Chemistry 2010, 82(15): 6593-6600.
[20] Aryal UK, Lin C, Kim J, Heibeck TH, Wang J, Qian W, et al. Identification of phosphorylated butyrylcholinesterase in human plasma using immunoaffinity purification and mass spectrometry. Analytica Chimica Acta 2012, 723(2012): 68-75.
[21] Harris DC. Quantitative Chemical Analysis (8e editie). New York: WH Freeman and Company; 2010. p. 519 – 525.
[22] Fidder A, Hulst AG, Noort D, de Ruiter R, van der Schans MJ, Benschop HP, et al. Retrospective detection of exposure to organophosphorus anti-cholinesterases: mass spectrometry analysis of phosphylated human butyrylcholinesterase. Chem. Res. Toxicol 2002, 15(2002): 582-590.
[23] Schopfer LM, Voelker T, Bartels CF, Thompson CM, Lockridge O. Reaction kinetics of biotinylated organophosphorus toxicant, FP-biotin, with human acetylcholinesterase and human butyrylcholinesterase. Chem. Res. Toxicol 2005, 18(4): 747-754.
[24] Wandhammer M, Carletti E, van der Schans M, Gillon E, Nicolet Y, Masson P, et al. Structural study of the complex stereoselectivity of human butyrylcholinesterase for the neurotoxic V- agents. The Journal of Biological Chemistry 2011, 286(19): 16783-16789.
[24] Blood Basics. American Society of Hematology.
Beschikbaar via: http://www.hematology.org/Patients/Basics/ Geraadpleegd op 1 juli 2014