LAB. DIERGENEESMIDDELEN
1981-08-14 Verslag 81.75 pr.nr. 505.2090OnderWerp: Bepaling van lasalocid-natrium door middel van HPLC.
Bijlage: 1.
Verzendlijst: Direkteur, sektorhoofd (3x), direktie VKA, afdeling Diergeneesmiddelen, Normalisatie (Hu~ue), Projektbeheer, Hollman.
8175
Lab. Diergeneesmiddelen 1981-08-14
VERSLAG 81.75 Pr.nr. 505.2090
Project: Normalisatie/harmonisatie van onderzoekmethoden voor dier-voeders
Onderwerp: Bepaling van lasalocid-natrium door middel van HPLC.
Bijlagen: 1.
Doel:
Oriënterend onderzoek voor de bepaling van lasolocid-Na in mengvoeders met behulp van de methode:
Bepaling van lasolacid (natrium) door HPLC. EEG doe. 1089/VI/81-E.
Samenvatting:
Lasolacid-natrium is volgens methode EEG doe. 1089/VI/81-E onderzocht in twee mengvoeders. De storende invloed van monensin, salinomycine en narasin werd eveneens bekeken.
Conclusie:
De vloeistofchromatografische analyse van lasalocid-natrium in meng-voeders is mogelijk. De EEG methode volgens doe. 1089/VI/81-E lijkt foutief opgesteld.
Verantwoordelijk: drs F.G. Buizer Medewerker/Samensteller: W.M.J. Beek.
Inleiding
Lasalocid-natrium wordt als coccidiostaticum toegepast voor het
gebruik van kippen op een doseringsniveau van 75-150 ppm. De voorkeur wordt gegeven aan een chemische analysemethode omdat zo'n methode spe
-cifieker is dan een microbiologische methode.
Bij een microbiologische methode storen narasin, salinomycine en monensin. Van de Belgische EEG delegatie werd een HPLC methode ont
-vangen waarbij lasalocid-Na eenvoudig te bepalen moet zijn zonder storingen.
De bepaling van lasalocid-Na door middel van HPLC volgens EEG doe. 1089/VI/81-E werd nader bestudeerd.
Methode EEG doe. 1089/VI/81-E 1 • ~r.!_n~i.E_e _
Lasalocid tolord t direkt geextraheerd van mengvoeders en premixen met de mobiele fase oplossing. Een aliquot deel van het extrakt wordt chromatografisch onderzocht door middel van hogedrukvloeistofchro-matografie met fluorescentiedetectie.
2 • .!_o~p~s~i~g~g~b.!_ei
De methode is geschikt voor de bepaling van lasalocid (natrium) in mengvoeders en premixen. De detectielimiet bedraagt 2 mg/kg.
Onderzoek
De methode werd toegepast op twee mengvoeders aan tolelke beide lasalocid-natrium werd toegevoegd. De mengvoeders t'laren niet van dezelfde samenstelling. Het ene mengvoeder bevatte geen en het andere to1el groenmeeL De monsters to1erden samengesteld als zouden ze bevatten: 0; 4,6 en 91 ppm aan lasalocid-natrium.
Resultaten
De in de bepalingsmethode aangegeven reversed phase kolom; 30 cm x 4 mm gepakt met 10 micron Z.!CH-10 t'lerd niet genomen maar een veel meer toegepaste nl. Lichrosorb 10 RP 18 4,6 mm ID x 30 cm lengte.
Het aangegeven eluens nl. een mengsel van tetrahydrofuraan - methanol - ammoniumhydroxyde en hexaan is geschikt voor "normal phase" chroma-tografie (lit. 7).
-- 2
-liet eluens werd dan ook ge1o1ijzigd in een mengsel van water-methanol en
diisopropylamine (32-68 en 0,01 Mol/I). De elutiesnelheid bedroeg 1,0
ml/min. De detectie geschiedde bij UV 302 nm (maximale absorptie) en
fluorescentiespectrometrlsch, excitatie filter 311 nm en emissie 430 nm
cutoff fllter.
Oe extraktie gesclliedrle met het bovenvermelde eluens, 1o1aarna di rekte
injectie in het chromatografische systeem volgde.
Oe resultaten staan vermeld in bijlage 1. De bepaling wordt niet
gestoord door narasin, sallnomycine en monensin.
Oe bepaling kan ook uitgevoerd worden door lasalocid-natrium na zuivering fluorescentiespectrametrisch te meten (lit. 6).
Hierbij storen de bovengenoemde stoffen evenmin.
De bovenbeschreven methode dient \•lel nog kritisch te lo7onlen bekeken,
zoals extraktietijd, extraktierolddel, eluens, HPLC etc. om tot een
nauHkeurige bepaling te komen.
Oe analyse kan ook spectrofluorimetrisch geschieden zonder storingen
en kan als methode naast de vloeistofchromatografische toegepast
lvor-den.
Conclusie:
De vloeistofchromatografische analyse van lasalocid-natrium in
meng-voeders ts mogelijk. De EEG methode volgens doe. 1089/VI/81-E lijkt
foutief opgesteld.
-- 3
-Literatuur
1. Bestimmung von Avatec (Lasalocid-Natrium) EEG doe. 2192/VI/78-D.
2. Critical evaluation of the Analytical determination of lasalocid (Avatec) in compound feedstuffs and premixes.
EEG doe. 5103/VI/78.
3. Cylinder Plate assay for Lasalocid Sodtum. Journal of the AOAC vol. 57, no. L1, 1974.
Auteurs, J.M. Scheiner, W.M. Gort en J, Chen.
4. AVATEC
Publicatie: Information Service
Animal Nutritton Department Roche.
5. Bepaling van lasalocid-Na.
EEG doe. 2192/VI/78.
6. Intern analysevoorschrift nr. Dgm 6.
1e oplage (1980-08-28).
Bepaling van lasalocid-natrium (fluorescentie-spectrometrische methode).
7. Liquid Chromatoeraphy l'lith Fluorescence detection of Lasalocid Sodium tn Feeds and Premtxes.
J. Assoc. Off. Anal. Chem., vol. 61, no. 5, 1978 pp 107L•- 1077. Auteurs: Nodest Osadca en Hereedes Araujo.
Bijlage 1 Hengvoeder Hengvoeder Hengvoeder Hengvoeder Hengvoeder Mengvoeder Mengvoeder lofengvoeder 8175.4 (groenmeel) Toevoeging (ppm) 0
