"Cytologie van incompatibiliteit 14) do epintintjt Tetranychus urticae Koch".

1198

"Cytologie van incompatibiliteit 14) do epintintjt Tetranychus urticae Koch".

•4

ts..Ir,tjir..:

: ..•ie.,.,.'a ;;,. 't:flp4

9/5UAA HAkcJd

Doctoraa]. vera].ag: Neflan Hopma

Periode: Febr, 75 — Ju].i 75.

in

Materiaal en Met

2.

Resultaten 3.

Discussie

^12.

13.

Literatuur 14.

jjaeI

^16.

geII ^22.

III

^34.

Inle iding.

De spintinijt Tetranychus urbicae Koch (Tetranychidae : Acarina) plant zich voort

door middel van arrhenotoke parthenogenese.

Bij

het onderling kruisen van

verochillende etammen

van

de spintmijt zijn

do hybriden meestal norniaal, inaar treodt vaak sterfte op onder de ha—

ploide

en diploide Feieren.Dit verechUnsel wordt genetische incompa—

tibiliteit genoemd. (i, 4,

5, 10)

Do sterfte percentages kunnon zeer hoog zjn. Some zljn de hy-briden vol—

komen

steriel,

Ult

populatiegenetisch onderzoek van Hello en Overmeer (ii)

block dat voor

de incompatibiliteit bij do spintmijt nog geen verkiaring gevonden is. Do oorzaken voor de incompatibiliteit kuimen chromosornaal dan wel crboplasniatisch zijn.

In

dit onderzoek is

gekeken of do incompatibiliteit veroorzaakt wordt door

chromosomale verochillen tuscen do stammen.

Uitgaande van do veronderstelling dat de stammen heterozygoot zijn voor

translocaties en inversies kunnen or in do rneiose abnormaliteiten op

treden en kunnen or tijdens do klievingcdelingen abnorrnale chromosomen en abnormale chrornosoom aantallen voorkomen.

Daarom

is ondorzoek verricht aan de meiotische doling en aan do coma—

tische chroniosomen tUdens de klievingsdelingen. Tovens is gekeken in welk

ontwikkelingsstadiuni de

embryonen van de niet uitgekomen Feie—

ren

doodgaan.

Materiaai en Methode.

Voor hot onderzook worden do volgende vier stammen van Tetranychus urticae Koch gebruikt:

De Noordam stain,

Do White Eye Baardse stam, De Gija Verbeek stain,

De van Leeuwon stain.

Alle stammen zjn afkomstig van rozenkwekers.

Volgens Overmeor vertonen de tammen eon slechte genetische affiniteit ten

opzichte van elkaar. (schriftelijke mededeling Overmeer)

Do stammen worden in het laboratorium gokweekt op blaadjes van do bo—

nenplant (Phaseolus vulgaris, varWteit "dubbele witte zonder

draad"),

Om to voorkomen dat do blaadjes uitdrogen worden de blaadjes op voch—

tige wattenbollon gelegd. Do bollen worden vochtig gehouden door ze op goporforeorde

alluminiu.m

schaaltjes in baicken met

water

to zetten, Om te voorkomen dat do mijten

van

de blaadjes lopon wordt een

opstaand

^wat—

tenrandje

om elk blad

gemaakt. Doze

^zogenaamde

blad cultures" wor—

den in klimaatbakkon geplaatst. De bakken worden continue verlicht door twee TL—buizen, Philips TLT 40 Watt.

Do temperatuur in do klimaatbakken variert van 23 tot 25 graden C.

Do kruisings experimenten wordon onclor do zelfde omstandigheden uitge—

voerd. In plaats van hole blaadjes worden stukjes blad gebruikt.

Do kruisingon worden ingezet door volwassen dte plaatsen bU te-.

leiochrysalis _(çç in

^hot

laatste nymphale ruststadiurn)

Paring treedt op direct na hot uitkomen van de . Eiproductie begint na n dag. Na vijf dagen wordon de oudors verwijderd. De F; oieren ont- wikkelon zich binnen acht s nogen dagen (afhankelUk van de temperatuur)

tot volwassen d'en ,

^De

volwassen 1 wordon overgezet op nieuwe bollen

^en

gaan Feieron leggen.

Hot

onderzook, is vorricht aan haploide Feioren omdat chromosoom ahbei ratios gemakkelijker to scoren zijn aan haploide dan aan diploide eieren.

Voor hot verkrjgen van haploide Feioren worden onbovruchte hybride gebruikt, Do onbovruchte worden in het teleiochrysalis stadium vor—

zameld.

Eioren in inelose worden verkrogen door volwassen hybrido steeds drie uur to laten leggen, Eieren in klieving worden verkregen door

ze uit de productio

van twintig uur leggen to verzamelen,

De eiletaliteit wordt gescoord aan do haploide Feieren die tien da—

gen na

leg

nog niet ult zijn.

Voor hot cytologisch onderzoek worden do eleren minimaal vUf dagen gefixeerd in carnoy (oen oplossing van absolute alcohol on ijsazijn

in

^do

verhouding 3:1), gelcleurd en gesquast in oen aceto—ljzer--haematoxyline—

chloralhydraat oplossing volgens Wittmann. (13)

Sommige pro paraten zUn semi—permanent geinaakt met nagellaic

Do

preparaten zijn met een Wild—microscoop bekeken.

Foto' zijn met een

Zeiss opzetcamera genoinen op eon ilford Pan

F 19 din

en

op eon Agfa Pan F 25 prof 15 en 19 din film,

Do gobruikte/\vergrotingen zUn: lOxlOxl,25x5,5 687,5x.

lOxlOOxl,25x5,5 = 6875x.

Reu1taten,

Tabel I t/ni IV: Letaliteitebepaling aan 1 eieren en aan haploide I1 eieren van

Tetranychus urticae Koch.

Tabel I: 30 Noordam gekruist met 15 d White Eye Baardse.

3,

exp. totaal aantal

haploide + di—

ploide 1 eieren

% niet uit—

gekomen

eieren

totaal aantal haploide F eieren

nietu—

gekomerr'F

eieren

1

250

2

159

63

2

171 4 202 79

3

175

7

176 60

4 ²¹³

^{0 — —}

5

121 4

— —

6

150 15

^{— —}

gem: 5

67

Tabel II: 30 White Eye Baardse gekruist met 15

Noordam.

exp,

totaal aantal haploide +

di

ploide

F, eieren

% niet uit—

gekomen

^F, eieren

Totaal aantal haploide F cieren

% niett—

gekomen

^F.

eieren

1

124

0

152 89

2

220

1

146 90

3

242

1

110 88

4 167

0 — —

5

229 4

^{— —}

6

309

1 ^{— —}

gem: 1

89

Tabel III: 18 van Leeuwen gekruist met 10 &' Gjs

Verbeek.

totaal aantal haploide + di—

ploide F, eieren

% niet

^uit—

gekomen F,

eieren

totaal aantal haploide

F

eieron

% niet

^ult—

gekomen

F eieren

2o9 75

—

—

—

3 0

—

—

—

213 213

280 207

178

63 83

72 36

77

2

66

Tabel IV: 20 van

totaal aantai

haploide + di—

ploide 1 eieren

% niet ^ult—

gekomen 1

eieren

totaal aantal haploide E eleren

% nieti1—

gekomen F eleren

192 147

—

-

3 3

—

—

-

255 197 110 131

184

88 79 84 89

84

3 85

Qierc in en

Tabel V:

1. De haploide 1 eleron van elk experiment zjn afkom—

stig van 10 onbevruchte hybride .

De

hebben gedurende 3

dagen

gelegd.

2. IJit de tabellen blijkt dat de elietaliteit in de zeer laag is en sterk toeneemt in de haploide l1•

3.

^De

eisterfte versehilt nauwelijks van de totale sterf—

te. Vrjwe1 alie levensvatbare eieren ontwikkelen zich tot voiwassen mijten.

4.

^Dc door Overineer goscoorde letaliteitepercentages staan vermeld in onderstaande tabel. (schriftelU—

he mededeling Overmeer) Kruising

i'oordam

^x White Eye Baardse White

Eye

Baardse x '&' Noordam van Leeuwen x c?8" GUs Verbeek

Gijs Verbeek

^x van Leeuwen

54 89

12

0

5

5

22

0

5

1

1 0

0

0

0

0 0 0 0 0 0 0

aanta]. onder—

zochte stadia, komt overeen met het aanta].

eieren 20 12 5

33

12

0

2 21 0 4 0 2 0

0 0 0 1

0

0

0

0 0 0 0 0 0 0

aantal onder—

aochte stadia, komt overeen

met hot aantal eieren

20 9

12

34

11

0

3

19

0 0 0 0

2 0 0 2

0

0

0

0 0 0 0 0 0 0

20

Gljs

aantal

^onder—

zochte stadia, komt overeen met hot aanta].

eieren 24 17 18 49

13

1

4 31

0

2 1 4 8

1 1 2

0

0j ji

Ch:;

0 0 0 0 0 0 0 Tabel VI: Onderzochte meiose stadia van

Koch.

Feieren van Tetranychus urticae

20 Noordam x

(A) 20

ineiose stadium

5.

(B)

15 White Eye Baardoe x 20 dd'

Noordam White Eye

Baardse aantal onder—

zochte stadia, komt overeen met hot aantal

eieren

aantal afwijkende

stadia

(0)

20 van Leeuwen x 10 d'd' Gjjs

Verbeelc

geheel meiotisch stadium zi chtbaar

aantal

afwijk

ende

stadia

30

12 7 29

0

1 0

0 metafase I

anafase I telofase I

metafase II + pooh metafase

metafase II + pooh I

ana—telofase of ana—

telofase II + pooh I

metafase

ana—telofase II + pooh I ana—telofase pooh I + II + voor—

kern

(D)

Verbeek x 10 &

van

Leeuwen aantal

afwjkende stadia

aantah afwijkende stadia

gedeelte meiotisch

stadium zi chtbaar

metafase II pooh I

pooh II pooh I + II anafase II voorkern

onidentifjceerbare structuren

1 3 0

totaal 129

Opmerkingen:

2

1

1. n ei met 2 anafase(A)

,,

,, met

2 chromosomen aan elkaar.(B) foto.

,,

met

2 bivalenten aan eikaar.(C)

,,met

een fragment naast de bivalenten.(0) foto.

,,

met

2 chromosomen aan elkaar.2x (C) foto.

/

met 2 bivalenten aan elkaar. 2x (D) foto •

met 2 chromosomen aan elkaar.4x (D) foto.

foto's: Bijiage I.

111

4

175 6

2. Do Feieren in meiooe van de kruioingen (A),(B),(a) en (D) zijn afkom$tig van reop. 150, 110, 90 en 80

hybride .

De eieren in kileving (tabel VII) zUn van dezelfde afkomstig. Do waren onbevrucht,

3. Op het moment van leg zijn de eiern in metafae I.

Dc chromosomen zjn dan als drie bivalenten zichtbaar.

Gedurende de eerste 2 tot 2-- uur (afhankeJijk van do temperatuur)worcien achtereenvoigens 66n mitotiche en 6n meiotiche deling doorlopen. Daarna beginnen de klievingedelingen. (2)

Om Feieren to krgen die in meloce zijn word om do drie

uur verzameld. ('s morgenc om 12 uur en

o mid—

dags om 3 uur)

4.

Uit de tabel volgt dat vrUwel alle eieren de meiose

norniaal doorlopen. Weinig eieren

hebben chromosomen met

afwijldngen. Do afwijkingen komen in verchi11ende

meioseotadia voor en zijn niet alie gelijk van karakter.

Tabel VII: Onderzochte haploide

urticae Koch. Feieren in klieving van Tetranychus

7.

Kruising cellig stadium totaal aantal eieren met

zichtbare

chromosomen

aantal eieren

niet afwijkende chromo somen of chromosoom

aantallen

20

Noor—

damx20&

White Eye Baarclse

2—cellig

4—

,,

8—

,,

16—

,,

32—

,,

64—

,,

1 2 5 1 0 0

0 0 0 0

0

0

totaal

9 0

20 White Eye Baardse

x20dd

Noordam

2—cellig

4—

,,

8-.

,,

16— ,, 32—

,,

64—

,,

2 12

14

3

5

4

0 0 0 0 0 0

totaal 40

0

2099van

Leouwen x 10

Gus

Verbeek

2—cellig

4—

,,

8—

,,

16—

,,

32—

,,

64—

,,

6

12 19 18 13

8

0 1 2 7 2 1

totaal 76 13

0 1 1 0 1 0

1 eel met 2 fragmenten.

1 eel met 1 fragment.

alle 8 cellen hebben afwijkencle chromosomen, de chromosomen ver—

sehillen in aantal en vorm.

,,

^:

1 eel met een brug tUdens anafase.

1 eel met 1 fragment (2 eieren) meerdere fragmenten in meerdere

cellen.

^{(2 eieren)}

20 ç Gjs

Verbeek x 10 dc3' van

Le euwen

2—cellig 4-

8—

16-.

,,

0 7

12 10 10

Oppprkingen:

44

1. (a) 4—cellig:

8—

,,

3

16—

chromoomen van 1 cci in degeneratie.

chromosomen van alle cellen in clege—

neratie,

32—cellig

:

1 cel met 2 fragmenten.

alie cc lien hebben afwijkencle chromo—

somen. Dc chromosomen verschilien in aantal en vorrn.

64— : 1

eel met 1

^fragment.

(D)

4— cellig: 1 ccl met 1 fragment

8—

,,

^:

1 cci met 4'netafaee platen en 1 eel

met 5 chromosomen,

32—

,,

^:

alle cellen hebben afwljkende chromo—

sornen. Dc chromosomen verechillen in aantai en vorm,

foto's: Bijiage I.

2. Dc kiievingsdelingen vinden plaats vanaf ± 2-b- uur tot

± 5 ^uur

na leg. (12)

Dc haploide eleren in klieving werden verzaincld uit de

hoeveeiheid eieren die ' nachts gelegd waren (vanaf

3

uur

's middags tot 's ochtends 9

uur).

3.

Uit de tabel voigt dat aileri

een aantai haploide Feieren van

d.c reciproke kruisingen van Leeuwen x GUs Verbeek

chromosoom afwijkingen hebben. Dc afwijkingen verscliil—

len van ci tdt ci

^{en van}

ccl tot eel.

.1

Tabel VIII:

Ontwikkelingef'ase van haploide embryonen van Tetranychus urticae

Koch.

aantal/% gescoord na ontwikke-.

lingsduur van

9.

1, Face I

:

1 tot veelcellig stadiuni, (1000—2000 cohen) Face II

^:

zeerveelcelhige tot vergedifferentieede

_embryonale

_stsdia. '!( 'y1'

Fae III: embryonen met beginnend pootaanleg

tot

vol— M ledige embryonen.

2. De eieren verschil]1ei3 onderling maxiinaal 3 uur in

1eeftjd. )c44 f

De

eieren in ontwikkehingfase I hebben veelal gedege—

nereerde

kernen, behalve de eleren die 2 dagen oud zijn.

Sominige

eieren, ondergebracht in ontwikkelingsfasel, hebben een vezelachtige structuur zonder duidehijke

chromo somen.

De meete eieren in ontwikkelingsstadium II zien er normaal uit,

Ahle eieren in ontwikkehingcfase III zien er normaal

uit. foto's: Bijiage II.

4. Uit de babel volgt dat in de controle ahle eieren na 6 dagen uit

^zijn.

Er

isgenr-ekening--gehoudemme-t ,de

uitgekomen

eleren van de kruising.

^F/I

Na

2 dagen zijn alle eieren van de controle stain al in ontwikkehingsctadium II. De eleren van de kruicing ont—

wikkelen

zich langzamer.

Er is nauwe]Jjks verchil in ontwikkehingc face tussen eieren van 6 dagen en eleren van 13 dagen oud.

Sterfte treedt op in alle ontwikkehlngsstadia.

aantal

van

haploide stam Gljs

eleren Verbeek

(controle

van

400

)

aantal haploide sing 120 Gijs

F eieren van Verbeek x 50

400 di3 van

van krui-

Leeuwen

aantal/% gescoord na ontvikkehingsduur van

ontwikkehingsfase I

•2cáoi-i

0

%

0

4 dagen

0

%

0

dagen

0

%

o

2 dagen

16

%

36

4 dagen

13

%

33

6 dagen 6

%

12

8.19 dagen

11

%

30

11 dagen

6

%

12

13 dagen

8

%

16

II III totaal

26 0 26

100 0 100

26 0 26

100 0 100

0 0 0

0 0 0

28 0

44 64

0 100

27 0 40

67 0 100

18 25

9

36 52 100

8 18 37

22 48 100

14 30 50

28 60 100

10 33 51

20 64 100

Opme rkingen.

>

I /

)

A,

Tabel IX: IJiter:Ujk hap].oide F,eieren van

die na tien dagen nog niet ult zijn. Tetranychu urticae Koch

uitgekomen eieren niet uitgekomen eieren kruising exp.

^totaal

aantal

haploide

Feieren

% uitgekomen

eieren aantal/% eleren

met embryonen met

oogvlek

aantal eleren

met embryonen zonder

^oogvlek

dode

larven

aantai

%

30 Noordam x

10 35' White Eye Baard$e

(A)

1 2 3

4

132 121 13].

123

25

26 39 28

50 45

23 44

53 52

30 50

44 41 54 44

4

3 1 0

gem: 29 46

30 White

Eye Baard se

x

12 3' ^Noor

dam (B)

1 2 3

4

93

86

53

74

20 14 23

21

38 34 14

27

54 49

36

47

33

36

25 31

4 4

2 2

gem: 20 47

30 van Leeuwen x 10

d'd"Glje Ver-.

beek (0)

1 2 3

4

114 98 89

102

32

38 30 31

27 16

23

23

35

26

37 33

50 45

39 47

0 0 0 0

gem: 33

33

120 Gjs Verbeek

x

50 Jd' van

Loeuwen (D)

1 2 3

4

147 127 90 122

8 10 8 7

97 82

43 57

71 72

51 50

39 .2

41

57

0 0 0 0

gem: 8 61

Tabe]. X: Ontwikkelingsface van de haploide embryonen van Tetranychuc urticae Koch uit tabel IX.

:1.1,

Kruising

Noorciam x White Eye

Daard so

(A)

White Eye Baardse x

Noordam

(B)

van Leouwen

x Gijs

Ve rbeek (C)

GUs Vorbeek

x van

Leeuwen

(D)

aantal eierei met embryonen ontwikkolingb'fase met

oogvlek

zonder oogvlek

met oogvlek

zonder oogvlek

met oogvlek

zonder oogvlck

met oogvlek

condor oogvlek I

II III

0 0 56

0

10 44

0 6

46

3

13

25

0 2

48

31 3 2

0

10 70

23 17

0

totaal

⁵⁶

54

⁵²

41 50

36

80 40

Qpmer1dn: 1. De haploide Feieren van elk experiment (tabel Ix) zUn afkomstig van 25 onbevruchte hyhride

Dc

hebben 21 uur gelegd.

2. Di.) de reciproke kruicingen Noorciam x White Eye Baardse zjn do niet uitgekomon eieren met embryonen zonder oog—

viek niet te onderseheiden van de niot uitgekomen eie ren met embryonen met wit oogvlek.

3. Hit tabel X blUict dat de mee ste embryonen met oogvlek, van kruicing (C)en (D) in face III zijn. Embryonen zonder oogvlek sterven in face I on II.

B1J kruising (A) en (B) gaan ook eieren met embryonen condor oogvlok in fase III dood. Doze embryonen heb—

ben waarschijnlijk witte oogvlekken.

Hit tabel IX en X volgtdat: a) Do embryonen van de niet uitgekomen eieren van de

kruisingen (A) en (B) voor hot merendeel in

face III sterven.

b) Dc embryonen van de niet uitLekome n krui sing (c) voor ongeveer 58% in face

I, 8% in face II en 34%

in fase III sterven,

c) Do embryonen van do niet uitgekomen eicren van kruicing (D) voor onueveer

23% in face I, 24% in face II en 53% in faso III ster—

foto's; Bijiage III, yen.

-n;.

^Y

Discuss.ie.

Zeer

woinig F,eieren in melose, afkometig van de 4 incompatibele kruisingen, White

Eye Baardse k

Noordam en Gijs Verbeek x van Leeuwen, hebbon zichtbare afwijkingen in de 3

chrornosomen.

(tabe]. VI)

Ook zijn tijdens de kiievingsdelingen in do haploide E eioren geen ab—

normale chromosomen en chromosoom aantallen gevonden, behalve :Ln de reciproke kruisingen Gjs Verbeek x van Leeuwen, (tabel VII)

Hier uit volgt dat de incompatibiliteit niet veroorzaakt wordt door grote tranlocaties en invorsios.

Btj bet onclerling kruisen van eon tetradifon gevoelige en eon tetradi f on resistente starn vondon Helle en Overmeer (ii) in do haploide zo—

we]. als in de diploide Feen grote eisterfte. Do haploide eleren wer—

den sterker aangetast dan do diploide. Do F eleren werden nauwe]djks aangetast. Op grond van deze gegevens ouggereerden zij dat tranlocaties en invorsiec, leidend tot verstoring van cle ineiose, do oorzaak zoudon kunnen zijn van de incompatibiliteit. Pit dit onderzoek blijkt dat dit niet hot geval is. De onderzoekingen zUn vergelijkbaar daar bij de voor dit onderzoek gekruiste stammen eveneens eon grote sterfte optreedt

onder de haploide en diploide Feieren, terwj1 do F, eieron levensvat—

baar zUn. ( tabel I t/m IV + ochriftelUke inededeling Overmeer)

In eon aantal cohen van do haploide F2eieren in khieving van do re—

ciproko kruisingen Gus Verbeek x van Leeuwen komen we]. afwij'kingen voor, namelijk fragmenten on godegenereerde chromosomen. De aard en penetra—

tie van doze abnormaliteiten ziJn to heterogeen oin er eon oorzaak voor aan te geven. Ret is echter niet waarschijnlijk dat de incompatibi].iteit

veroorzaakt wordt door' bet optreden van fragmenten tijden latere Idle—

vings dehingen. (8—16—32—celhig)

Hot grote verschil in storfto van de haploide F2oieren van de recipro ke kruisingen (tabel I t/m IV, 7, , 9, 10) wjst op faktoren die via hot cytoplasma ovorerven on zo invloed hebben op do incompatibiliteit.

Eon cytoplacmatische faktor afleen verklaart niet de incompatibihiteit biJ do spintmijt aangezien doze invloed in oen analoge situatie, 1. c.

bet rnicroorganisme Wolbachia bij Culex Pipiens, (6, 14) aanleiding geeft tot volledige sterihiteit, terwiji bU de spiritrnijt do sterfte percentages

in do Ivan kruising tot kruising sterk varigren. Bovendion wijst bet bij do haploide Foioren hogere letahitoitspersentage dan bj de diploide F eleren crop dat chromosomale afwijkingen invloed hebben op de incompa—

tibilitoit, in die zin dat or in de diploide eieren waarschijn1jk ge—

deoltolijke compencatie optreedt door de 3 ' chrornosornen en er dus in—

vloed van de chromosomen is.

Do ontwikkeling van do haploide F1eieren van de kruising GUs Ver—

beck x van Leeuwen duurt hanger en blijft niet bU ahle eieren in bet zelfdo embryonale stadium steken, (tabel VIII) Ook is or tucson do ver—

schillende kruisingen verschil in embryonaal stadium waarin bj de rnees—

te eieren de ontwikkehing stopt. (tabel IX en x)

Een

complex van factoron op gen niveau is waarcchijnlUk de oorzaak van (10 incompatibihiteit.

Onderzoek

op populatiegonetisch gebied biedt mogelijk meer dan karyolo—

gisch ondorzook,

nvatt1n.

a) Do genetische incompatibiliteit bij

d.e pintmijt Tetranychus

urticae Koch wordt niet veroorzaakt door grote trans1ocatie en inversies.

b) Niet alloen sterven de haploide Feieren van de 4

incompatibele kruisingon in verchi11ende ein bry-onale stadia, maar ook is or b1j elke kruising een ander stadium waarin de meoste eieren ster—

ven.Di-t wiJst -erop dat de genetische incompatibili—

teit veroorzaakt wordt door eon sarnenspel van moor—

dere faktoren.

13.

tuur: 1. Boudreaux, H. B. 1963.

Biological aspects of some

phytophagous mites.

Ann.

Rev. Entomol, 8: 137—54 2. Felertag—Koppen, 0. 0. N.

Meiosis in the eggs of the

two—spotted

spider mite, Tetranychus urticae Koch,

In litt.

3. Belle, W., Bolland, H. R. 1967.

Karyotypes and sex—determination in spider mites

(Tetranychidae).

Genetica: 38: 43—53

4.

Belle,

W,, Overmeer, _W. P.

J.

^1973.

Variability

in Tetranychid mites, Ann. Boy.

Entomol.

18: 108—9 5.;Helle, W.,

Pieterse,

A. H. 1965.

Genetic affinities between adjacent populations of spider mites.

Entomol. Exp.

Appi. 8: 305—8

6.

Laven,

^H.

1967.

Speciation and evolution in

Culex pipiens.

Genetics

of insect vectors of disease, edo:

J.

W. Wright and R. Pal (Elseviers, Amsterdam):

251—75

7. Overmeer, W, P. J. 1965.

Intersterility as a consequence of tedion selec- tions

in Tetranychus urticae Koch,

Boll. Zool. Agr. Bachicolt, Serb II, 7: 227—31

8, Overmeer, W. P. J.

1965.

Peculiarities of resistence to tedion in Tetra—

nychus

urticae Koch,

Medded. Landbouwhogesch. Opzoekingssta. Staat Gent. 30: 1400—2

9.

Overmeer, W.

P. J. 1966.

Intersterility as a consequence of insecticide selections in Tetranychus urticae Koch.

Nature:

209: 321

10. Overmeer, W, P. J. 1967.

Genetics

of resistence to tedbon in Tetranychus urticae

C. L. Koch.

Arch. Neer, Zool. 17: 295—349.

11. Ovoniieer, N. P. J.,

^{Belle, H.}

Decreased genetic compatibility between

two

strains

of Tetranychus urticae Koch.

nbot gepubliceerd manuscript.

12. Pijnacker, L. P., Ferworda, M.

A. 1972.

Diffuse kinetochore in

^the

chromosome

s of the

arrhenotokous spider mite, Tetranychus urticae Koch.

Experientia : 354

13. Wittmann, W. 1965.

Aceto—iron—haematoxylin—chloralhyclrate for chroinooom staining.

Stain Tech. Q:

^161—64

14.

Yen, J. H., Barr, A. R. 1973.

Incompatibility

^{in Culex.}

The

use of genetics in insect control, eds:

R. Pal and N. J. hitten (Elseviers, Amsterdam):

97—117

15.

jj1cde me lo ce $tadia.

Kruig ^White

^Eye

I3aarde x &

^Noorciam,

foto

nr, (1). 2-bi-valenten aaieikaar in metafase II,

sin van Leeuwen x Gljs Verbeek,

foto nr. (2). Eon fragment naast do drie bivalenten.

,, ,, (3).

² chromoomen aari1kaar in metafase

II,

jig

^GUs Verbeek x van Leouwen.

foto nr.

(4).

² bivalenton aanelkaar,

,,

,, (5).

2 chi'oriiosômèn aanelkaar inanafase I.

(6). 2 chromosomen aaneikaar in telofase I.

AjflcQe ldievinsstadia.

in

van Leeuwe n x G1Js Ve rbe ek.

foto nr. (7). 8—cellig: 2 ceflen met afwjkend aental (8).

chromosoinen.

jisig

^Gije

^Verbeek

^x van Leeuwen, foto nr. (9). 8—cellig: ccl met 4 metafase platen.

*

e

(I.)

I

4 1%

13.

I

7.

(9.

7

. •)1

3.

B1age II

Stam GUs Verbeek.

Eieren na ontwikkelingsduur van 2 dagen.

foto nr.

^(1).

Embryo in ontwikkeiingsfase II.

(2). ,, II.

(3). ,, II.

Eleren na ontwikkelingsduur van 4 dag.

foto

^{nr. (11).}

Embryo in ontwikkelingsfase II.

Kruisin GUs Verbeek x dc

van

Leeuwen.

Eleren

na ontwikkelingsduur van 2 dagen.

foto nr. _(4). Embryo in ontwikkelingfase II.

(5).

,, II.

(6).

,, II.

(7).

,, I.

(8).

,, I.

::

:: :: ^zelfde ei.

Eleren na ontwikkelingsduur van 4

dagen.

foto nr. (12). Embryo in ontwikkelinC$fa5e II.

,, ,, (13). ,, II.

,, ,, (14). ,, II.

:: :: :: :: :}ze1rae

Eieren na ontwikkoLLngsduur van 6 dagen.

foto

^{nr, (17).}

Embryo in ontwikkelingsfase III.

el.

Eleren

na ontwike1ingsduur van 8,19 dagen.

foto

^{nr. (21).}

Embryo in ontwikkelingsfase I.} zelfde ci.

Eleren na ontwikkelingsduur van lidagen.

foto nr. (24). Embryo in ontwikkelingsfase I.

1.

22.

' r

3.

U ^•4•

•,

•.

^t.

A

•ij

w

Ak!,r

,

"— I •• ^—

aii.u''%,\ ':

I

fri

Iz.

24

S

I

P

t;4

*.

4

,, .tt

41k1t

i1

—p. "'V

4.

-

a

I

. C'

*

4.

_&;c,i4_ '•* S (It

1'-

—

.t :±:';

-..* 'S

,?

SbSt

L.

r c :-

- I,•,'_-

' bSa

¼-,

-4- %

:4

' a

* . -

.

/ I

S

:

-

5, -

S

V ,

- 0

-

- S

- 54 - - -

- -. S

0

: - -

- S -

5

•

•*%%tES?*/*

^' _*

,•

0 ^•'

• _tc1(-

St * I

•t

,,

5, -

,•

S

1.4t

p '44'

.1

•• "

i''tt ^¶4.

^-

C

^—

t

*

-S

a

S

.4

' -.

•

•iØ•

^•

V.

*

•:

*

;a.

• :-- ^• ... ...

• , ,•

_..••.. ^k

a . S. -

•.:- •. ^a

• 4

A%

-

3Z

* :

^{• •}

!; ^1,

1w.

• ,. I If.

a

t,t. S ' _{- '}

'-

•.

S p

a V

V

I

S.' 5*5

•

.4'

-.

•:

V.

•0

I,

-

S

4

•;

a

i;

1

.;S-

• 4:

S.-

-','

^_.,'4

14

BUlage III

Kruiing White Eye Baarde x Noordam.

foto nr. (1). Embryo in ontwikke1ingstadiuin III.

Kruising van Leeuwen x o?'GUs Verbeek.

foto nr. (2). Embryo in ontwikkelingsfase I.

,,

,, (3). ,, I.

,,

,, (4). ,, ,, I.

,,

,, (5). ,, I.

Knii,ging Gijs Verbeek x ?'van Leeuwen.

foto nr. (6). Embryo in ontwikkelingsfase I.

,,

,, (7). ,, ,, I.

,,

,, ^(8). ,, I.

b

V.

*

'4

Aol a.

'f's

I.

a.

V

I

4

It.'.

C.0

'S

:;:.e

::

•..• st%;,

^.4

3 —.

,e,

S • ^p

•:

I

:4.

4' 4

• 4.

I •,

• 4

4 .

4 ' 4

4

•* ..

S.'. 4

4,p

4 •

''

41 ' ^{. .} .4 ^II .4

4 I4_

4

'

'.: >-.

4 I

4 •

.4

4

.4

S p

I

0

'e0i2.. r

.4

k4:

.'

4.'

*

•44

as, 14'

^•

''

4 4

*1"

a

.4

^t

4t _'*

'St.

4

ga 4

3.

//4

'4

4. 4•i

4r

_I

,8'

4

. t ^I

ft

,

^.1

.t St

.44

^',4t-

1'

4 ,, ^{4, 4}

--p

•

- 4

j F.'

k 'L ^':-' ;

•1Ø4'4W - .

- 4_

I _p

•

S :

*4' •

% ,%

b'

s e

'4, ^_4. 4,

... •4, -%

4 4_• 4-

1''

•.

.4 I;

.4a. -S

a1,,t

S p.

4 1

..; ^-;'

\4_- j4. .," at

• t.''.-_ ^I

'

• 'S..'

^•

•' .,nt t-FO.

-

i-I S •

, ^{'.'.bf a j ,}

^.4

• r ^4'

^.

^.*1

^I

4

ç,I

S.

6.

S

* '4,

V._p. ^I;44•

,.i#'

-, ^r

'F

t,.t. '<b'.

^{' 4 4}

•It

t

p

I

4

ii

^I

^*

1.

9.

\Li..

4