The inflammable truth of atherosclerosis - Chapter 6: Remnant cholesterol elicits arterial wall inflammation and a multilevel cellular immune response in humans

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The inflammable truth of atherosclerosis

Verweij, S.L.

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2018

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Verweij, S. L. (2018). The inflammable truth of atherosclerosis.

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Peripheral blood mononuclear cells were isolated from fresh whole blood samples through ĚĞŶƐŝƚLJ ĐĞŶƚƌŝĨƵŐĂƟŽŶ ƵƐŝŶŐ >LJŵƉŚŽƉƌĞƉΡ ;džŝƐͲ^ŚŝĞůĚ͕ ƵŶĚĞĞ͕ ^ĐŽƚůĂŶĚͿ͘ DŽŶŽĐLJƚĞƐ ǁĞƌĞƚŚĞŶŝƐŽůĂƚĞĚƵƐŝŶŐŚƵŵĂŶϭϰŵĂŐŶĞƟĐďĞĂĚƐĂŶĚD^ΠĐĞůůƐĞƉĂƌĂƟŽŶĐŽůƵŵŶƐ ;DŝůƚĞŶLJŝ͕ĞƌŐŝƐĐŚ'ůĂĚďĂĐŚ͕'ĞƌŵĂŶLJͿ͘

ĞůůƐ ǁĞƌĞ ĐŽƵŶƚĞĚ ďLJ ĐĂƐLJĐŽƵŶƚ ;ZŽĐŚĞ /ŶŶŽǀĂƟƐ ĂƐLJ dd͕ ŝĞůĞĨĞůĚ͕ 'ĞƌŵĂŶLJͿ ĂŶĚ ƐƉůŝƚ ĨŽƌ ĚŝīĞƌĞŶƚ ĞdžƉĞƌŝŵĞŶƚƐ͘ DŽŶŽĐLJƚĞƐ ǁĞƌĞ ĂĚĚĞĚ ƚŽ ĮďƌŽŶĞĐƟŶ ;&E͖ ϯϬ ђŐͬŵůͿ ĐŽĂƚĞĚ ŐůĂƐƐŵŝĐƌŽƐĐŽƉĞƐůŝĚĞƐŝŶĂĐŽŶĐĞŶƚƌĂƟŽŶŽĨϬ͕ϱΎϭϬ6_{ͬŵůĂŶĚŝŶĐƵďĂƚĞĚĨŽƌϭŚŽƵƌĂƚϯϳΣ͕} ϱйK₂͕ĂŌĞƌǁŚŝĐŚƚŚĞLJǁĞƌĞĮdžĞĚǁŝƚŚϰйĨŽƌŵĂůĚĞŚLJĚĞĂŶĚǁĂƐŚĞĚǁŝƚŚW^͘^ůŝĚĞƐ ǁĞƌĞ ƉĞƌŵĞĂďŝůŝnjĞĚ ĂŶĚ ŝŶĐƵďĂƚĞĚ ǁŝƚŚ ƚŚĞ ůŝƉŝĚ ĚLJĞ EŝůĞ ZĞĚ ;ϭ ђŐͬŵů͖ EϯϬϭϯͲϭϬϬD'͕ ^ŝŐŵĂ ůĚƌŝĐŚ͕ ǁŝũŶĚƌĞĐŚƚ͕ ƚŚĞ EĞƚŚĞƌůĂŶĚƐͿ ǁĂƐŚĞĚ ǁŝƚŚ W^ ĂŌĞƌ ĂŶĚ ŵŽƵŶƚĞĚ ƵƐŝŶŐ ŇƵŽƌĞƐĐĞŶƚŵŽƵŶƟŶŐŵĞĚŝƵŵ;ĂŬŽ͕,ĞǀĞƌůĞĞ͕ĞůŐŝƵŵͿ͘/ŵĂŐŝŶŐǁĂƐƉĞƌĨŽƌŵĞĚŽŶĂ>ĞŝĐĂ d^^WϴŽŶĨŽĐĂůůĂƐĞƌƐĐĂŶŶŝŶŐŵŝĐƌŽƐĐŽƉĞ͘YƵĂŶƟĮĐĂƟŽŶŽĨůŝƉŝĚĚƌŽƉůĞƚƐǁĂƐƉĞƌĨŽƌŵĞĚ ďLJ ƵƐŝŶŐ /ŵĂŐĞͲ: ƐŽŌǁĂƌĞ ;ŚƩƉ͗ͬͬƌƐď͘ŝŶĨŽ͘ŶŝŚ͘ŐŽǀͬŶŝŚͲŝŵĂŐĞͿ͕ ĂƐƐĞƐƐŝŶŐ ƚŽƚĂů ŶƵŵďĞƌ ŽĨ ŵŽŶŽĐLJƚĞƐǁŝƚŚůŝƉŝĚĚƌŽƉůĞƚƐƉĞƌĮĞůĚŽĨǀŝĞǁ;&KsͿ͕ĂƐǁĞůůĂƐƚŚĞŶƵŵďĞƌŽĨůŝƉŝĚĚƌŽƉůĞƚƐ ƉĞƌƉŽƐŝƟǀĞŵŽŶŽĐLJƚĞŝŶϲͲϭϬ&KsƐ͘&ƵƌƚŚĞƌŵŽƌĞ͕ǁĞƵƐĞĚĂŶŝŶǀŝƚƌŽŵŽĚĞů͕ŝŶĐƵďĂƟŶŐ ŚƵŵĂŶŵŽŶŽĐLJƚĞƐǁŝƚŚĨƌĞƐŚůLJŝƐŽůĂƚĞĚƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůŝŶǀĂƌŝŽƵƐĐŽŶĐĞŶƚƌĂƟŽŶƐ͘ /ŶǀŝƚƌŽĞīĞĐƚŽĨƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůŽŶ,^WƉƌŽŐĞŶŝƚŽƌƉŽƚĞŶƟĂů >ĞƵŬĂƉŚĞƌĞƐŝƐŵĂƚĞƌŝĂůŽĨŚĞĂůƚŚLJĚŽŶŽƌƐƚƌĞĂƚĞĚǁŝƚŚ'Ͳ^&;ϱͲϭϬŵŐͬŬŐͬĚĂLJͿǁĂƐƵƐĞĚƚŽ ŽďƚĂŝŶϯϰн_{ĐĞůůƐ͕ĞŶƌŝĐŚĞĚďLJŵĂŐŶĞƟĐĂĐƟǀĂƚĞĚĐĞůůƐŽƌƟŶŐĂĐĐŽƌĚŝŶŐƚŽŵĂŶƵĨĂĐƚƵƌĞƌ} ŝŶƐƚƌƵĐƟŽŶƐ;D^͖DŝůƚĞŶLJŝŝŽƚĞĐ͕ĞƌŐŝƐĐŚ'ůĂĚďĂĐŚ͕'ĞƌŵĂŶLJͿ͕ƌĞƐƵůƟŶŐŝŶĂƉƵƌŝƚLJŽĨ ŵŽƌĞƚŚĂŶϵϬƉĞƌĐĞŶƚ͕ĂƐĚĞƚĞƌŵŝŶĞĚďLJŇŽǁĐLJƚŽŵĞƚƌLJ͘ϯϰн _{cells were plated in 96 well}

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RESULTS

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higher uptake of 18_{&Ͳ&'ŝŶƚŚĞďŽŶĞŵĂƌƌŽǁŽĨ&ƉĂƟĞŶƚƐĐŽŵƉĂƌĞĚǁŝƚŚĐŽŶƚƌŽůƐ;^hs} mean & ƉĂƟĞŶƚƐ ϭ͘ϴϯцϬ͘ϯ ǀĞƌƐƵƐ ĐŽŶƚƌŽů ϭ͘ϱϲцϬ͘Ϯ͕ ƉсϬ͘Ϭϱϭ ĂŶĚ ^hs_ŵĂdž& ƉĂƟĞŶƚƐ Ϯ͘ϳϵцϬ͘ϲ ǀĞƌƐƵƐĐŽŶƚƌŽůϮ͘ϯϯцϬ͘ϯ͕ƉсϬ͘Ϭϰϭ͕&ŝŐƵƌĞϯ͕ϯ͕ϯͿ͘DŽƌĞŽǀĞƌ͕ŝŶ&ƉĂƟĞŶƚƐŝŶĐƌĞĂƐĞĚ&' ƵƉƚĂŬĞŝŶƚŚĞďŽŶĞŵĂƌƌŽǁĐŽƌƌĞůĂƚĞĚƐŝŐŶŝĮĐĂŶƚůLJƚŽůĞƵŬŽĐLJƚĞĐŽƵŶƚƐ;^hsmeanƌсϬ͘ϱϳϳ͕ r2_{сϬ͘ϯϯ͕ƉсϬ͘Ϭϭϱ͕^hs} ŵĂdžƌсϬ͘ϱϬϲ͕ƌ 2_{сϬ͘Ϯϱ͕ƉсϬ͘Ϭϯϴ;ƐĞĞ^ƵƉƉůĞŵĞŶƚĂů&ŝŐƵƌĞ///ͿͿ͘tŚĞƚŚĞƌ} ƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůĂůƐŽĂĐĐƵŵƵůĂƚĞŝŶŚƵŵĂŶ,^WƐŚĂƐŶĞǀĞƌďĞĞŶŝŶǀĞƐƟŐĂƚĞĚ͘

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ǁŝƚŚĐŽŶƚƌŽůƐ;CͿ͘In vitroĞdžƉĞƌŝŵĞŶƚƐƐŚŽǁĞĚĂŶŝŶĐƌĞĂƐĞĚůŝƉŝĚĂĐĐƵŵƵůĂƟŽŶŝŶ,^WƐĂŌĞƌϮϰŚŽƵƌŝŶĐƵďĂƟŽŶ ǁŝƚŚƉĂƟĞŶƚͲĚĞƌŝǀĞĚƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůĐŽŵƉĂƌĞĚǁŝƚŚĐŽŶƚƌŽůͲĚĞƌŝǀĞĚƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽů;͕Ϳ͘ŌĞƌϳĚĂLJƐ͕ ƚŚŝƐĐŽͲŝŶĐƵďĂƟŽŶƌĞƐƵůƚĞĚŝŶŝŶĐƌĞĂƐĞĚĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶŽĨϭϯͬϯϯƉŽƐŝƟǀĞ,^WƐ͕ĂŵĂƌŬĞƌĨŽƌƚŚĞŵLJĞůŽŝĚůŝŶĞĂŐĞ ;FͿ͘EŽĚŝīĞƌĞŶĐĞŝŶƐŬĞǁŝŶŐƚŽǁĂƌĚƐƚŚĞŵĞŐĂŬĂƌLJŽĐLJƟĐ;ϯϰͬϰϭƉŽƐŝƟǀĞĐĞůůƐͿ;'ͿĂŶĚƚŚĞĞƌLJƚŚƌŽŝĚůŝŶĞĂŐĞ ;ϰϱͬϯϲƉŽƐŝƟǀĞĐĞůůƐͿǁĂƐŽďƐĞƌǀĞĚ;HͿ͘ΎƉфϬ͘Ϭϱ͘&͗ĨĂŵŝůŝĂůĚLJƐďĞƚĂůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶĞŵŝĂ͖,^WƐ͗ŚĞŵĂƚŽƉŽŝĞƟĐ ƐƚĞŵĂŶĚƉƌŽŐĞŶŝƚŽƌĐĞůůƐ͖^hs͗ƐƚĂŶĚĂƌĚƵƉƚĂŬĞǀĂůƵĞ

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dĂďůĞϮ͘ s ĂůŝĚĂ ƟŽŶŝŶŽƉĞŶŚĂŐ ĞŶW ŽƉƵůĂ ƟŽŶ^ƚƵĚLJŝŶϭϬϯ͕ϵϱϯŝŶĚŝǀŝĚƵĂůƐ Z ĞŵŶĂŶ ƚĐŚŽůĞƐ ƚĞ ƌŽů͕ŵŵŽůͬ> фϬ͘ϱ Ϭ͘ϱͲϬ͘ϵϵ ϭ͘ϬϬͲϭ͘ϰϵ ϭ͘ϱͲϭ͘ϵϵ шϮ WĨ Žƌƚƌ ĞŶĚ Number ϯϲ͕ϰϰϲ ϰϲ͕ϵϲϵ ϭϰ͕ϴϭϴ 4514 1206 >ĞƵŬ ŽĐLJƚ ĞƐ͕ϭΎϭϬ -9ͬ> ϲ͘ϴ;ϱ͘ϴͲϳ͘ϵͿ ϳ͘Ϭ;ϲ͘ϬͲϴ͘ϮͿ ϳ͘Ϯ;ϲ͘ϮͲϴ͘ϰͿ ϳ͘ϰ;ϲ͘ϯͲϴ͘ϲͿ ϳ͘ϰ;ϲ͘ϰͲϴ͘ϵͿ 5*10 -276 DŽŶŽĐLJ ƚĞƐ͕ϭΎϭϬ -9ͬ> Ϭ͘ϯϵ;Ϭ͘ϯϮͲϬ͘ϰϳͿ Ϭ͘ϰϬ;Ϭ͘ϯϯͲ͘ϰϵͿ Ϭ͘ϰϮ;Ϭ͘ϯϰͲϬ͘ϱϭͿ Ϭ͘ϰϮ;Ϭ͘ϯϰͲϬ͘ϱϮͿ Ϭ͘ ϰϯ;Ϭ͘ϯϱͲϬ͘ϱϮͿ 1*10 -155 >LJŵƉŚŽĐLJƚ ĞƐ͕ϭΎϭϬ -9ͬ> Ϯ͘Ϭ;ϭ͘ϳͲϮ͘ϰͿ Ϯ͘ϭ;ϭ͘ϳͲϮ͘ϱͿ Ϯ͘Ϯ;ϭ͘ϴͲϮ͘ϲͿ Ϯ͘Ϯ;ϭ͘ϴͲϮ͘ϳͿ Ϯ͘ϯ;ϭ͘ϵͲϮ͘ϴͿ 4*10 -238 EĞƵƚƌ ŽƉŚŝůƐ͕ϭΎϭϬ -9ͬ> ϯ͘ϵ;ϯ͘ϮͲϰ͘ϴͿ ϰ͘ϭ;ϯ͘ϯͲϰ͘ϵͿ ϰ͘ϭ;ϯ͘ϰͲϱ͘ϭͿ ϰ͘Ϯ;ϯ͘ϱͲϱ͘ϭͿ ϰ͘Ϯ;ϯ͘ϱͲϱ͘ϮͿ 4*10 -126 EƵŵďĞƌ Ɛ ŽĨ ϭϬϯ͘ϵϱϯ ŝŶĚŝǀŝĚƵĂůƐ Ĩƌ Žŵ ƚŚĞ ŽƉĞŶŚĂŐ ĞŶ WŽƉƵůĂ ƟŽŶ ^ƚ ƵĚLJ Ĩƌ Žŵ ϮϬϬϯͲϮϬϭϱ͘ ůŽŽĚ ůĞƵŬ ŽĐLJƚ ĞƐ͕ ŵŽŶŽĐLJ ƚĞƐ͕ ůLJŵƉŚŽĐLJ ƚĞƐ ĂŶ Ě ŶĞƵƚƌ ŽƉŚŝůƐ ǁ Ğƌ Ğ ĂĚũƵƐ ƚĞĚ ĨŽƌ ƵŶŝƚƐ ĂůĐ ŽŚŽůƉĞƌǁ ĞĞŬ͕ƐŵŽŬŝŶŐƐ ƚĂ ƚƵƐ͕ƟŵĞƐŝŶĐĞůĂƐ ƚŵĞĂůĂŶĚĨ Žƌď ŽĚLJŵĂƐƐŝŶĚĞ dž͘s ĂůƵĞƐĂƌ ĞƐŚŽǁŶĂƐŵĞĚŝĂŶ;ŝŶ ƚĞ ƌƋƵĂƌƟůĞƌ ĂŶŐ ĞͿ ͘

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REFERENCES

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Ϯ͘ sĂƌďŽ͕ĞŶŶD͕EŽƌĚĞƐƚŐĂĂƌĚ'͘ZĞŵŶĂŶƚ cholesterol as a cause of ischemic heart ĚŝƐĞĂƐĞ͗ĞǀŝĚĞŶĐĞ͕ĚĞĮŶŝƟŽŶ͕ŵĞĂƐƵƌĞŵĞŶƚ͕ ĂƚŚĞƌŽŐĞŶŝĐŝƚLJ͕ŚŝŐŚƌŝƐŬƉĂƟĞŶƚƐ͕ĂŶĚƉƌĞƐĞŶƚ and future treatment. Pharmacol ther. ϮϬϭϰ͖ϭϰϭ͗ϯϱϴͲϯϲϳ͘

ϯ͘ sĂƌďŽ͕ĞŶŶD͕dLJďũčƌŐͲ,ĂŶƐĞŶĞƚĂů͘ ZĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůĂƐĂĐĂƵƐĂůƌŝƐŬĨĂĐƚŽƌ for ischemic heart disease. J Am Coll Cardiol. ϮϬϭϯ͖ϲϭ͗ϰϮϳͲϰϯϲ͘

ϰ͘ EŽƌĚĞƐƚŐĂĂƌĚ'͕sĂƌďŽ͘dƌŝŐůLJĐĞƌŝĚĞƐĂŶĚ cardiovascular disease. Lancet. ϮϬϭϰ͖ϯϴϰ͗ϲϮϲͲ 635. ϱ͘ sĂƌďŽ͕ĞŶŶD͕dLJďũĂĞƌŐͲ,ĂŶƐĞŶĞƚĂů͘ ůĞǀĂƚĞĚZĞŵŶĂŶƚŚŽůĞƐƚĞƌŽůĂƵƐĞƐŽƚŚ >ŽǁͲ'ƌĂĚĞ/ŶŇĂŵŵĂƟŽŶĂŶĚ/ƐĐŚĞŵŝĐ,ĞĂƌƚ ŝƐĞĂƐĞ͕tŚĞƌĞĂƐůĞǀĂƚĞĚ>ŽǁͲĞŶƐŝƚLJ>ŝ-ƉŽƉƌŽƚĞŝŶŚŽůĞƐƚĞƌŽůĂƵƐĞƐ/ƐĐŚĞŵŝĐ,ĞĂƌƚ ŝƐĞĂƐĞtŝƚŚŽƵƚ/ŶŇĂŵŵĂƟŽŶ͘ŝƌĐƵůĂƟŽŶ͘ ϮϬϭϯ͖ϭϮϴ͗ϭϮϵϴͲϭϯϬϵ͘ ϲ͘ EĂŬĂũŝŵĂ<͕EĂŬĂŶŽd͕dĂŶĂŬĂ͘dŚĞŽdžŝĚĂ- ƟǀĞŵŽĚŝĮĐĂƟŽŶŚLJƉŽƚŚĞƐŝƐŽĨĂƚŚĞƌŽƐĐůĞ-ƌŽƐŝƐ͗ƚŚĞĐŽŵƉĂƌŝƐŽŶŽĨĂƚŚĞƌŽŐĞŶŝĐĞīĞĐƚƐ ŽŶŽdžŝĚŝnjĞĚ>>ĂŶĚƌĞŵŶĂŶƚůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶƐŝŶ plasma. Clin chim acta. ϮϬϬϲ͖ϯϲϳ͗ϯϲͲϰϳ͘ ϳ͘ ĂƩ<s͕ǀĞůůĂD͕DŽŽƌĞ,ĞƚĂů͘ŝīĞƌĞŶ-ƟĂůĞīĞĐƚƐŽĨůŽǁͲĚĞŶƐŝƚLJůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶĂŶĚ ĐŚLJůŽŵŝĐƌŽŶƌĞŵŶĂŶƚƐŽŶůŝƉŝĚĂĐĐƵŵƵůĂ-ƟŽŶŝŶŚƵŵĂŶŵĂĐƌŽƉŚĂŐĞƐ͘džƉŝŽůDĞĚ͘ ϮϬϬϰ͖ϮϮϵ;ϲͿ͗ϱϮϴͲϱϯϳ͘ ϴ͘ ƵƩĂW͕ŽƵƌƟĞƐ'͕tĞŝzĞƚĂů͘DLJŽĐĂƌĚŝĂů ŝŶĨĂƌĐƟŽŶĂĐĐĞůĞƌĂƚĞƐĂƚŚĞƌŽƐĐůĞƌŽƐŝƐ͘Nature. ϮϬϭϮ͖ϰϴϳ͗ϯϮϱͲϯϮϵ͘ ϵ͘ sĂŶĞƌsĂůŬ&D͕<ƌŽŽŶ:͕WŽƩĞƌƐtsĞƚĂů͘/Ŷ ǀŝǀŽŝŵĂŐŝŶŐŽĨĞŶŚĂŶĐĞĚůĞƵŬŽĐLJƚĞĂĐĐƵŵƵ-ůĂƟŽŶŝŶĂƚŚĞƌŽƐĐůĞƌŽƟĐůĞƐŝŽŶƐŝŶŚƵŵĂŶƐ͘J Am Coll Cardiol.ϮϬϭϰ͖ϲϰ͗ϭϬϭϵͲϭϬϮϵ͘ ϭϬ͘ ƵƩĂW͕EĂŚƌĞŶĚŽƌĨD͘ZĞŐƵůĂƟŽŶĂŶĚ ĐŽŶƐĞƋƵĞŶĐĞƐŽĨŵŽŶŽĐLJƚŽƐŝƐ͘Immunol Rev. ϮϬϭϰ͖ϮϲϮ͗ϭϲϳͲϭϳϴ͘ ϭϭ͘ 'ŽǁĞƌZD͕tƵ,͕&ŽƐƚĞƌ'ĞƚĂů͘ϭϭĐͬ ϭϴĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶŝƐƵƉƌĞŐƵůĂƚĞĚŽŶďůŽŽĚ ŵŽŶŽĐLJƚĞƐĚƵƌŝŶŐŚLJƉĞƌƚƌŝŐůLJĐĞƌŝĚĞŵŝĂĂŶĚ enhances adhesion to vascular cell adhesion molecule-1. ƌƚĞƌŝŽƐĐůĞƌdŚƌŽŵďsĂƐĐŝŽů͘ ϮϬϭϭ͖ϯϭ;ϭͿ͗ϭϲϬͲϭϲϲ͘ ϭϮ͘ sĂŶĞƌsĂůŬ&D͕<ƵŝũŬ͕sĞƌǁĞŝũ^>Ğƚ Ăů͘/ŶĐƌĞĂƐĞĚŚĂĞŵĂƚŽƉŽŝĞƟĐĂĐƟǀŝƚLJŝŶ ƉĂƟĞŶƚƐǁŝƚŚĂƚŚĞƌŽƐĐůĞƌŽƐŝƐ͘Eur Heart J. ϮϬϭϳ͕ϯϴ͗ϰϮϱͲϰϯϮ ϭϯ͘ DĂƌĂŝƐĂ͕^ŽůŽŵŽŶ'Ă͕ůŽŵ:͘LJƐďĞƚĂů-ŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶĂĞŵŝĂ͗ĂŵŝdžĞĚŚLJƉĞƌůŝƉŝĚĂĞŵŝĂ ŽĨƌĞŵŶĂŶƚůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶƐĚƵĞƚŽŵƵƚĂƟŽŶƐ ŝŶĂƉŽůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶ͘ƌŝƚƌĞǀĐůŝŶůĂďƐĐŝ͘ ϮϬϭϰ͖ϱϭ͗ϰϲͲϲϮ͘ ϭϰ͘ dĂǁĂŬŽů͕DŝŐƌŝŶŽZY͕ĂƐŚŝĂŶ''ĞƚĂů͘/Ŷ sŝǀŽϭϴ&Ͳ&ůƵŽƌŽĚĞŽdžLJŐůƵĐŽƐĞWŽƐŝƚƌŽŶŵŝƐ- ƐŝŽŶdŽŵŽŐƌĂƉŚLJ/ŵĂŐŝŶŐWƌŽǀŝĚĞƐĂEŽŶŝŶǀĂ-ƐŝǀĞDĞĂƐƵƌĞŽĨĂƌŽƟĚWůĂƋƵĞ/ŶŇĂŵŵĂƟŽŶ ŝŶWĂƟĞŶƚƐ͘J Am Coll Cardiol. ϮϬϬϲ͖ϰϴ͗ϭϴϭϴͲ 1824. ϭϱ͘ ,ĂƐƚLJ,͕>ŝŶƚŽŶD&͕^ǁŝŌ>>ĞƚĂů͘ĞƚĞƌ- ŵŝŶĂƟŽŶŽĨƚŚĞůŽǁĞƌƚŚƌĞƐŚŽůĚŽĨĂƉŽůŝƉŽ-ƉƌŽƚĞŝŶƌĞƐƵůƟŶŐŝŶƌĞŵŶĂŶƚůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶ clearance. J Lipid Res. ϭϵϵϵ͖ϰϬ;ϴͿ͗ϭϱϮϵͲϭϱϯϴ͘ ϭϲ͘ ĞƌŶĞůŽƚDŽĞŶƐ^:͕^ƚŽĞŬĞŶďƌŽĞŬZD͕ ǀĂŶĚĞƌsĂůŬ&DĞƚĂů͘ĂƌŽƟĚĂƌƚĞƌŝĂůǁĂůů ŝŶŇĂŵŵĂƟŽŶŝŶƉĞƌŝƉŚĞƌĂůĂƌƚĞƌLJĚŝƐĞĂƐĞŝƐ ĂƵŐŵĞŶƚĞĚďLJƚLJƉĞϮĚŝĂďĞƚĞƐ͗ĂĐƌŽƐƐͲƐĞĐ-ƟŽŶĂůƐƚƵĚLJ͘DĂƌĚŝŽǀĂƐĐŝƐŽƌĚ͘ ϮϬϭϲ͖ϭϲ;ϭͿ͗Ϯϯϳ͘ ϭϳ͘ ŵĂŵŝ,͕^ŝŶŐŚW͕DĂĐEĂďďDĞƚĂů͘^ƉůĞŶŝĐ ŵĞƚĂďŽůŝĐĂĐƟǀŝƚLJƉƌĞĚŝĐƚƐƌŝƐŬŽĨĨƵƚƵƌĞ ĐĂƌĚŝŽǀĂƐĐƵůĂƌĞǀĞŶƚƐ͗ĚĞŵŽŶƐƚƌĂƟŽŶŽĨĂ ĐĂƌĚŝŽƐƉůĞŶŝĐĂdžŝƐŝŶŚƵŵĂŶƐ͘JACC Cardiovasc Imaging. ϮϬϭϱ͖ϴ;ϮͿ͗ϭϮϭͲϭϯϬ͘ ϭϴ͘ ďĞůĞƐZ͕DĐWŚĂŝůD:͕^ŽǁƚĞƌĞƚĂů͘ϭϰ͕ ϭϲĂŶĚ,>ͲZƌĞůŝĂďůLJŝĚĞŶƟĮĞƐŚƵŵĂŶ ŵŽŶŽĐLJƚĞƐĂŶĚƚŚĞŝƌƐƵďƐĞƚƐŝŶƚŚĞĐŽŶƚĞdžƚ ŽĨƉĂƚŚŽůŽŐŝĐĂůůLJƌĞĚƵĐĞĚ,>ͲZĞdžƉƌĞƐƐŝŽŶ ďLJϭϰŚŝͬϭϲŶĞŐŵŽŶŽĐLJƚĞƐ͗džƉĂŶƐŝŽŶŽĨ ϭϰŚŝͬϭϲƉŽƐĂŶĚĐŽŶƚƌĂĐƟŽŶŽĨϭϰůŽͬ ϭϲƉŽƐŵŽŶŽĐLJƚĞƐŝŶĂĐƵƚĞůŝǀĞƌĨĂŝů͘LJƚŽŵ-ĞƚƌLJ͘ϮϬϭϮ͖ϴϭ͗ϴϮϯͲϴϯϰ͘

6

ϭϵ͘ sĂƌďŽ͕&ƌĞŝďĞƌŐ::͕EŽƌĚĞƐƚŐĂĂƌĚ'͘ džƚƌĞŵĞŶŽŶĨĂƐƟŶŐƌĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůǀƐ ĞdžƚƌĞŵĞ>>ĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůĂƐĐŽŶƚƌŝďƵƚŽƌƐƚŽ ĐĂƌĚŝŽǀĂƐĐƵůĂƌĚŝƐĞĂƐĞĂŶĚĂůůͲĐĂƵƐĞŵŽƌƚĂůŝƚLJ in 90000 individuals from the general popula-ƟŽŶ͘Clin Chem. ϮϬϭϱ͖ϲϭ͗ϱϯϯͲϱϰϯ͘ ϮϬ͘ yƵ>͕ĂŝWĞƌƌĂƌĚy͕WĞƌƌĂƌĚ:>ĞƚĂů͘&ŽĂŵLJ ŵŽŶŽĐLJƚĞƐĨŽƌŵĞĂƌůLJĂŶĚĐŽŶƚƌŝďƵƚĞƚŽŶĂƐ- ĐĞŶƚĂƚŚĞƌŽƐĐůĞƌŽƐŝƐŝŶŵŝĐĞǁŝƚŚŚLJƉĞƌĐŚŽ-lesterolemia. ƌƚĞƌŝŽƐĐůĞƌdŚƌŽŵďsĂƐĐŝŽů͘ ϮϬϭϱ͖ϯϱ͗ϭϳϴϳͲϭϳϵϳ͘ Ϯϭ͘ dĂůůZ͕zǀĂŶĐŚĂƌǀĞƚ>͘ŚŽůĞƐƚĞƌŽů͕ŝŶŇĂŵŵĂ-ƟŽŶĂŶĚŝŶŶĂƚĞŝŵŵƵŶŝƚLJ͘Nat Rev Immunol. ϮϬϭϱ͖ϭϱ͗ϭϬϰͲϭϭϲ͘ ϮϮ͘ dĂďĂƐ/͕tŝůůŝĂŵƐ<:͕ŽƌĞŶ:͘^ƵďĞŶĚŽƚŚĞůŝĂů ůŝƉŽƉƌŽƚĞŝŶƌĞƚĞŶƟŽŶĂƐƚŚĞŝŶŝƟĂƟŶŐƉƌŽĐĞƐƐ ŝŶĂƚŚĞƌŽƐĐůĞƌŽƐŝƐ͗ƵƉĚĂƚĞĂŶĚƚŚĞƌĂƉĞƵƟĐ ŝŵƉůŝĐĂƟŽŶƐ͘ŝƌĐƵůĂƟŽŶ͘ϮϬϬϳ͖ϭϭϲ;ϭϲͿ͗ϭϴϯϮͲ 1844. Ϯϯ͘ ǀĂŶtŝũŬ&͕^ũŽƵŬĞ͕&ŝŐƵĞƌŽĂĞƚĂů͘ Nonpharmacological lipoprotein apheresis ƌĞĚƵĐĞƐĂƌƚĞƌŝĂůŝŶŇĂŵŵĂƟŽŶŝŶĨĂŵŝůŝĂů ŚLJƉĞƌĐŚŽůĞƐƚĞƌŽůĞŵŝĂ͘J Am Coll Cardiol. ϮϬϭϰ͖ϲϰ;ϭϰͿ͗ϭϰϭϴͲϭϰϮϲ͘ Ϯϰ͘ 'ŽůĚďĞƌŐ/:͕ĐŬĞůZ,͕DĐWŚĞƌƐŽŶZ͘dƌŝŐůLJĐĞƌ- ŝĚĞƐĂŶĚŚĞĂƌƚĚŝƐĞĂƐĞ͗ƐƟůůĂŚLJƉŽƚŚĞƐŝƐ͍Ar-ƚĞƌŝŽƐĐůĞƌdŚƌŽŵďsĂƐĐŝŽů͘ϮϬϭϭ͖ϯϭ;ϴͿ͗ϭϳϭϲͲ 1725. Ϯϱ͘ ŝŵĂƚŽdZ͕WĂůŬĂ͕>ĂŶŐ:<ĞƚĂů͘>> ŚŽůĞƐƚĞƌŽůDŽĚƵůĂƚĞƐ,ƵŵĂŶϯϰн,^WƐ ƚŚƌŽƵŐŚīĞĐƚƐŽŶWƌŽůŝĨĞƌĂƟŽŶĂŶĚƚŚĞ/>Ͳϭϳ 'Ͳ^&džŝƐ͘Plos One. ϮϬϭϯ͖ϴ͘ Ϯϲ͘ ůůŝŽƩW͕ŚĂŵďĞƌƐ:͕ŚĂŶŐtĞƚĂů͘'ĞŶĞƟĐ >ŽĐŝĂƐƐŽĐŝĂƚĞĚǁŝƚŚͲƌĞĂĐƟǀĞƉƌŽƚĞŝŶůĞǀĞůƐ ĂŶĚƌŝƐŬŽĨĐŽƌŽŶĂƌLJŚĞĂƌƚĚŝƐĞĂƐĞ͘JAMA. ϮϬϬϵ͖ϯϬϮ;ϭͿ͗ϯϳͲϰϴ͘ Ϯϳ͘ ŽůůĂďŽƌĂƟŽŶZW,'͕tĞŶƐůĞLJ&͕'ĂŽW ĞƚĂů͘ƐƐŽĐŝĂƟŽŶďĞƚǁĞĞŶƌĞĂĐƟǀĞƉƌŽƚĞŝŶ ĂŶĚĐŽƌŽŶĂƌLJŚĞĂƌƚĚŝƐĞĂƐĞ͗ŵĞŶĚĞůŝĂŶ ƌĂŶĚŽŵŝƐĂƟŽŶĂŶĂůLJƐŝƐďĂƐĞĚŽŶŝŶĚŝǀŝĚƵĂů ƉĂƌƟĐŝƉĂŶƚĚĂƚĂ͘D:͘ϮϬϭϭ͖ϯϰϮ͗ϱϰϴ͘ Ϯϴ͘ <ŽůŽǀŽƵ'͕DŝŬŚĂŝůŝĚŝƐW͕<ŽǀĂƌ:ĞƚĂů͘Ɛ- ƐĞƐƐŵĞŶƚĂŶĚůŝŶŝĐĂůZĞůĞǀĂŶĐĞŽĨEŽŶͲ&ĂƐƚ-ŝŶŐĂŶĚWŽƐƚƉƌĂŶĚŝĂůdƌŝŐůLJĐĞƌŝĚĞƐ͗ŶdžƉĞƌƚ Panel Statement. Curr Vasc Pharmacol. ϮϬϭϭ͖ϵ;ϯͿ͗ϮϱϴͲϮϳϬ͘

SUPPLEMENTS

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^ƵƉƉůĞŵĞŶƚĂůdĂďůĞϯ͘ĂƐĞůŝŶĞĐŚĂƌĂĐƚĞƌŝƐƟĐƐŽĨWdͬdĐŽŶƚƌŽůĐŽŚŽƌƚ ŚĂƌĂĐƚĞƌŝƐƟĐ ŽŶƚƌŽůƐ ;ŶсϭϳͿ &ƉĂƟĞŶƚƐ ;ŶсϭϳͿ ƉͲǀĂůƵĞ ^Ğdž͕ŵĂůĞͬĨĞŵĂůĞ ϵͬϴ ϭϮͬϱ 0.290 ŐĞ͕LJ ϱϳцϲ ϲϬцϴ 0.179 ŽĚLJŵĂƐƐŝŶĚĞdž͕ŬŐͬŵ2 _{Ϯϰ͘ϯцϯ͘ϲ Ϯϳ͘ϯцϯ͘ϳ 0.023} ^ŵŽŬŝŶŐ͕LJĞƐͬŶŽ Ϯͬϭϱ ϰͬϭϯ 0.368 WĞƌŝƉŚĞƌĂů^W͕ŵŵ,Ő ϭϯϴцϭϮ ϭϯϴцϭϯ 0.945 WĞƌŝƉŚĞƌĂůW͕ŵŵ,Ő ϴϮцϭϬ ϴϲцϭϬ 0.184 dŽƚĂůĐŚŽůĞƐƚĞƌŽů͕ŵŵŽůͬ> ϱ͘ϰϱцϬ͘ϵϯ ϳ͘ϮϳцϮ͘ϱ 0.011 >>ĐŚŽůĞƐƚĞƌŽů͕ŵŵŽůͬ> ϯ͘ϯϱцϬ͘ϵϮ Ϯ͘ϬϴцϬ͘ϲϮ фϬ͘ϬϬϭ ,>ĐŚŽůĞƐƚĞƌŽů͕ŵŵŽůͬ> ϭ͘ϲϵцϬ͘ϯϳ ϭ͘ϰϮцϬ͘ϯϱ 0.034 ZĞŵŶĂŶƚĐŚŽůĞƐƚĞƌŽů͕ ŵŵŽůͬ> 0.4[0.21-0.5] 3.26[2.07-5.71] фϬ͘ϬϬϭ dƌŝŐůLJĐĞƌŝĚĞƐ͕ŵŵŽůͬ> 0.89[0.47-1.11] 4.30[2.81-5.3] фϬ͘ϬϬϭ >Ɖ;ĂͿ͕ŵŐͬ> 71[44-280] 120[71-400] 0.250 ZW͕ŵŐͬĚ> 1.3[0.7-2.0] 2.6[1.1-3.9] 0.059 t͕ϭΎϭϬ-9_{ͬ> ϲ͘Ϭцϭ͘ϱ ϲ͘ϰцϬ͘ϵ 0.273} >LJŵƉŚŽĐLJƚĞƐ ϭ͘ϵцϬ͘ϰϵ Ϯ͘ϭϵцϬ͘ϱϳ 0.123 Neutrophils ϯ͘ϰϱцϭ͘ϯ ϯ͘ϱцϬ͘ϲϮ 0.902 DŽŶŽĐLJƚĞƐ Ϭ͘ϰϯцϬ͘ϭϯ Ϭ͘ϱϲцϬ͘ϭϭ 0.003 dŚĞďĂƐĞůŝŶĞĐŚĂƌĂĐƚĞƌŝƐƟĐƐǁĞƌĞďĂƐĞĚŽŶƚŚĞŝŶĐůƵĚĞĚƉĂƟĞŶƚƐǁŝƚŚ&ĂŶĚƚŚĞĐŽŶƚƌŽůƐĨŽƌƚŚĞWdͬdƐĐĂŶ ĞdžƚƌĂĐƚĞĚĨƌŽŵĂŶĞdžŝƐƟŶŐĐŽŚŽƌƚ͘sĂůƵĞƐĂƌĞŶ͕ŵĞĂŶц^ŽƌŵĞĚŝĂŶ΀/YZ΁ĨŽƌŶŽŶͲŶŽƌŵĂůůLJĚŝƐƚƌŝďƵƚĞĚĚĂƚĂ͘