De invloed van wisselende temperaturen op de stuifmeelkieming, de kiembuisgroei en de bevruchting van de tomaat 1970

B I B L I O T H £ £ K ! véöir de Groenten- en r- rHi-rilî pr,.iar O-'is te

Naaldwijk,

r5

iV>

De invloed van wisselen­

de temperaturen op de

stuifmeelkieming, de

kiembuisgroei en de be­

vruchting van tomaat

P R O E F S T A T I O N VOOR D E G R O E N T E N - EN F R U I T T E E L T ONDER G L A S T E NAALDWIJK • s i n v l o e d van w i s s e l e n d s t e m p e r a t u r e n op d e s t u i f m e e l -k i e m i n g , d e -k i e m b u i s g r o e i en d s bevruchting van de t o m a a t ( P r o j e c t C 4) 1 9 7 0 . d o o r : W . van R a v e s t i j n . N a a l d w i j k , f e b r u a r i 1 9 7 2 N o . 4 8 8 / 1 9 7 2

Inhoud I n l e i d i n g P r o e f o p z e t R e s u l t a t e n S a m e n v a t t i n g B i j l a g e n . e n c o n c l u s i e

2 -P r o j e c t C 4 . I n l e i d i n g I n v r o e g e r e proeven ( o * a . i n 1 9 6 2 ) i s d e i n v l o p d van d e t e m p e ­ r a t u u r en d e l u c h t v o c h t i g h e i d o p d e s t u i f m e e l k i e m i n g van d e t o m a a t n a g e g a a n . H i e r b i j bleek d a t d e o p t i m u m t e m p e r a t u u r v o o r d e s t u i f m e e l k i e m i n g o m s t r e e k s 25°C m o e t l i g g e n . I n k a s s e n h e e r s e n e c h t e r w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n , v o o r n a m e l i j k v e r o o r z a a k t d o o r h e t d a g - n a c h t r i t m e . I n d e z e proef werd d e invloed van deze w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n n a g e g a a n i n e e n g e b i e d , d a t v r i j n o r m a a l genoemd mag w o r d e n , m a a r w a a r b i j h e t v e r s c h i l t u s s e n " d a g " e n " n a c h t " t o c h w e l z 6 g r o o t w a s , d a t m o c h t d i t van i n v l o e d z i j n , d i t h i e r b i j w e l tot u i t i n g m o e s t k o m e n . lil e l m o e t h i e r w o r d e n o p g e m e r k t , d a t d o o r d e n i e u w e b e o o r d e l i n g s ­ t e c h n i e k d o o r m i d d e l van d e U . U . - m i c r o s c o o p , h e t v e r l o o p o v e r een l a n g e r e p e r i o d e k o n p l a a t s v i n d e n d a n bij d e p r o e f v a n 1 9 6 2 . In d e i n 1 9 6 2 g e n o m e n p r o e f vónden d s c o n t r o l e s 2 e n 5 u u r n a d e bestuiving p l a a t s . I n d e z e p r o e f werd S u u r e n 1 - 2 e n 3 d a g e n n é d e bestuiving g e f i x e e r d . P r o e f o p z e t

D e proef vond p l a a t s i n d e s e r i e - t h e r m o s t a a t . D e bestuivingen v o n d e n p l a a t s o p > g e c a s t r e e r d e bloemen, d i e o p een v o e d i n g s ­ bodem s t o n d e n . D e g e b r u i k t e bodem w a s e e n K n o p s - b o d e m ( z i e b i j l a g e 1 ) . D e r e l a t i e v e l u c h t v o c h t i g h e i d w a s v o o r a l l e behandelingen s t e e d s c i r c a 7 0 ^ . D i t werd d o o r m i d d e l van e e n w a t e r g l y c e r i n e -m e n g s e l g e r e g e l d . D e d r i e i n g e s t e l d e t e m p e r a t u r e n w a r e n : 1 5 ° - 1 8 ° e n 2 5 ° C . D e w i s s e l i n g e n i n t e m p e r a t u u r w e r d e n v e r k r e g e n d o o r d e bloemen o p h e t g e w e n s t e o g e n b l i k n a a r d e v e r l a n g d e t e m p e r a t u u r o v e r t e b r e n g e n . E r werd g e d u r e n d e d e d a g l i c h t g e g e v e n m e t 2 T L - b u i z e n p e r a f d e l i n g . D e l i c h t e n brandden van 0 8 . 3 0 - 1 6 . 3 0 u u r . D e „ d a g t e m p e r a t u u r " w e r d . 8 u r e n g e g e v e n e n w a s 2 5 ° C . D e „ n a c h t t e m p e r a t u u r " w a s 15°C e n werd g e d u r e n d e 1 6 u r e n g e g e v e n . P e r e t m a a l k r e g e n d e bloemen d u s : 8 x 2 5 + 1 6 x 1 5 : 2 4 = + 1 8 ° C p e r u u r . D a a r o m werd a l s c o n t r o l e b e h a l v e c o n t i n u 1 5 ° e n 2 5 ° C o o k c o n t i n u 1 8 ° C o p g e n o m e n .

3

-Tevens is het mogelijk de bestuiving vlak voor ds "warme"

als wel vlak voor de "koude" periode te doen plaatsvinden.

D i t i s d u s v e r g e l i j k b a a r m e t een bestuiving r e s p e c t i e v e l i j k b i j het begin e n b i j het e i n d e van de d a g .

D a a r o m w e r d e n d e v o l g e n d e behandelingen vergeleken : o 1 8 1 . C o n t i n u 1 8 C ( / 1 8 g e n o e m d ) 2 . P e r e t m a a l 8 u u r 25°C e n 1 6 u u r 1 5 ° C , t e beginnen b i j 2 5 ° C 2 5 ( 0 8 . 3 0 u u r ) ( / 1 5 g e n o e m d ) 3 . P e r e t m a a l 8 u u r 2 5 ° C e n 1 6 u u r 1 5 ° C , t e beginnen b i j 1 5 C 1 5 ( 1 6 . 3 0 u u r ) ( / 2 5 g e n o e m d ) 4 . C o n t i n u 1 5 ° C 5 . C o n t i n u 2 5 ° C . H e t v e r k o r t e w e r k s c h e m a i s i n bijlage 2 o p g e n o m e n . De t e m p e r a t u u r g e g e v e n s z i j n i n bijlage 3 o p g e n o m e n .

De

f i x a t i e s vronden 5 u r e n e n 1 - 2 e n 3 d a g e n n £ d e bestuiving p l a a t s » * h e t g e e n

evsneena

i n bijlage 2 i s o p g e n o m e n .

Na het f i x e r e n w e r d e n d e bloemen v o l g e n s h e t i n bijlage 4 o p g e ­ n o m e n r e c e p t behandeld e n w e r d e n de v e r k r e g e n p r e p a r a t e n o n d e r d e U . U . - m i c r o s c o o p bekeken, geteld e n gemeten.

R e s u l t a t e n

A l l e verkregen g e g e v e n s z i j n volledig i n bijlage 5 o p g e n o m e n

v o o r e v e n t u e l e l a t e r e w i s k u n d i g e v e r w e r k i n g . D e v e r w e r k t e g e g e v e n s z i j n i n bijlage 6 t e z i e n .

stui^rneQlkiemir]g i n vitro werd van

êên

p a r t i j s t u i f m e e l om 1 0 . 0 0 u u r e n 1 6 . 3 0 u u r i n g e z e t . D o o r het 6-J u u r i l a t e n s t a a n v a n het' s t u i f m e e l l e e k d i t i n vifcio a c h t e r u i t t e z i j n g e g a a n . D e g e v o n d e n w a a r d e n w a r e n r e s p e c t i e v e l i j k 15,1 e n 6 , 0 ^ , d u s m o g e l i j k een a c h t e r u i t g a n g van 6 0 $ ! B i j d e beoordeling z a l h i e r z o n o d i g r e k e n i n g m e e worden g e h o u d e n . 1 5 A l l e e n behandeling 3 , d u s / 2 5 k o n h i e r v a n n a d e e l o n d e r v i n d e n . D e s t u i f m e e l k i e m i n g op d e s t e m g e l werd voor h e t eerst 5 . u r e n n ! d e bestuiving b e p a a l d . Op d a t moment waren e r f e i t e l i j k nog m a a r 3 behandelingen t e w e t e n : c o n t i n u 1 5 ° - 1 8 ° en 2 5 ° C ,

w a a r b i j 1 5 ° C d u s d e 2 s t u i f m e e l s o o r t e n betrof ( z i e boven, d u s " v e r s " e n 6-£ u u r o n d e r ) . B i j h e t k i e m i n g s p e r c e n t a g e k o m t een e v e n t u e l e m i n d e r e kieming b i j behandeling 3 n i e t n a a r voren, z o d a t h i e r a a n

_ 4

-niet t e v e e l g e c o r r i g e e r d hoeft t e w o r d e n .

H e t k i e m i n g s p e r c e n t a g e w a s 5 u u r na d e bestuiving het beste bij 2 5 ° en 18°C, m e t onderling geen betrouwbare v e r s c h i l l e n .

H e t g e m i d d e l d e l a g o m s t r e e k s 8 0 % . D e kieming bij 15°C w a s d u i d e l i j k m i n d e r ( g e m i d d e l d 5 8 à 7 4 % ) .

D e hechting Leek s t e r k e r d o o r d e t e m p e r a t u u r beïnvloed t e m o r d e n . H o e h o g e r de t e m p e r a t u u r , d e s t e meer s t u i f e e l op de s t e m p e l ( 2 5 ° C t u s s e n 1 7 2 - 2 1 1 , 18°C t u s s e n gemiddeld 1 3 7 - 1 5 0 en 15°C

t u s s e n gemiddeld 9 7 - 1 1 6 ) . D i t i s d u s i n d i r e k t een a a n w i j z i n g d a t de h o g e r e t e m p e r t u r e n een betere kieming g a v e n , o m d a t j u i s t d o o r het kiemen de hechting tot stand k o m t .

B e h a l v e de p o s i t i e v e i n v l o e d van de t e m p e r a t u u r op de hechting werd ook een d u i d e l i j k e p o s i t i e v e c o r r e l a t i e g e v o n d e n t u s s e n t e m p e r a t u r e n en kiernbuislengte _ , , . . „,-o_

2 — . |\|a 5 u r e n waren deze b i j 2 5 C gemiddeld 9 5 0 - 1.025^U l a n g h e t g e e n m e t 14,9 - 1 6 , 3 % van de s t i j l l e n g t e overeenkwam» B i j 18°C w a r e n de k i e m b u i z e n

ongeveer •

2 9 4 - 319^JU l a n g ( 4 , 6 à 4 , 9 % van d e s t i j l l l e n g t e ) en b i j 15°C s l e c h t s 1 0 0 - 1 4 6 ( 1 , 5 à 2 , 3 % van d e s t i j l l e n g t e ) ,

Na 5 uren k a n men d u s k o n k l u d e r e n , dat van de d r i e g e b r u i k t e t e m p e r a t u r e n de h o o g s t e t e m p e r a t u u r de s n e l s t e kieming g a f hetgeen i n d e k i e m t m i s b e z e t t i n g op de s t e m p e l en d e kiern­ b u i s l e n g t e tot u i t d r u k k i n g k w a m . D e l a a g s t e t e m p e r a t u u r g a f de minst g u n s t i g e u i t k o m s t e n e n d e t u s s e n l i g g e n d e t e m p e r a t u u r g a f i n t e r m e d i ä r e u i t k o m s t e n . D e s t u i f m e e l k i e m i n g na dag g a f m i n d e r d u i d e l i j k e v e r s c h i l l e n t e z i e n dan n a _5 u r e n . D i t i s niet z o v e r w o n d e r l i j k , o m d a t

bij een g o e d e s t u i f m e e l k i e m i n g , z o a l s d e z e werd vastgesteld n a 5 u r e n , n a een l a n g e r e k i e m i n g s t i j d ( één dag en." l a n g e r ) h e t

o m d a t

s t u i f m e e l m i n d e r goed t e h e r k e n n e n valt het v e e l a l v o l l e d i g 1 5

i s l e e g g e g r o e i d . D e s t u i f m e e l k i e m i n g l e e k bij / 2 5

2 5 1 5 2 5

m i n d e r t e z i j n dan bij / 1 5 . O n g e v e e r g e l i j k waren / 2 5 en / 2 5 . 1 8

H e t h o o g s t e k i e m i n g s p e r c e n t a g e gaf / 1 8 en dit w a s v r i j w e l g e l i j k 1 5

met / 1 5 . D e h e c h t i n g - g e g e v e n s o n t l i e p e n e l k a a r n a u w e l i j k s 2 5

( t u s s e n 1 5 6 en 1 6 6 ) . Alleen / 2 5 v i e l wat uit de toon m e t 1 1 7 k o r r e l s per s t e m p e l . D e l e n g t e n van de k i e m b u i z e n l e k e n e l k a a r O O PC nauwelijks^fce o n t l o p e n , h o e w e l h i e r b i j de g e v o n d e n v e r s c h i l l e n nog h e t m e e s t l o g i s c h l e k e n . V r i j w e l gelijk waren

2 5 1 8 2 5 1 5

/ 2 5 en / 1 8 ; / 1 5 e n / 2 5 w a r e n o o k o n d e r l i n g g e l i j k e n

2 g

1

0

5 -1 5 / 1 5 had nog de k o r t s t e k i e m b u i z e n . H e t p e r c e n t a g e " a f g e l e g d e afstand i n d e s t i j l " v a r i e e r d e van 2 5 1 8 1 0 0 - 9 9 , 6 ^ v o o r r e s p e c t i e v e l i j k / 2 5 en / 1 8 . B i j d e w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n v a r i e e r d e dit van 89,1 - 100%, d u s n a u w e l i j k enig v e r s c h i l met de h o o g s t e t e m p e r a t u r e n . D e l a a g s t e t e m p e r a t u u r

1 5

( / 1 5 ) had een voor 7 9 , 8 ^ d o o r g e g r o e i d e s t i j l e n u a s d u s het m i n s t v e r . Aangezien de kiembuizen r e e d s ver d o o r g e g r o e i d waren k o n va,nafdeze f i x a t i e o o k n a a r de bevruchting w o r d e n g e k e k e n . 2 5 1 8 1 5 H i e r b i j bleek, dat / 2 5 - / 1 8 en / 1 5 r e s p e c y i e v e l i j k 1 0 0 - 7 0 en 1 0 ^ v r u c h t b e g i n s e l s met bevruchte z a a d k n o p p e n t e z i e n g a v e n . D e z e p e r c e n t a g e s w e r d e n d 8 " z e t t i n g " g e n o e m d . B i j 2 5 1 5 ~ ~ / 1 5 en / 2 5 w a s de z e t t i n g r e s p e c t i e v e l i j k 8 0 tot 1 0 0 ^ , 1 8 d u s z e k e r niet m i n d e r dan bij de g e m i d d e l d e t e m p e r a t u u r van / 1 8 . Onderling w a s het v e r s c h i l gering en t e g e n g e s t e l d aan d e w a a r d e n , d i e bij s t u i f m e e l t e l l i n g e n op d i e dag waren v e r k r e g e n . H e t p e r ­ c e n t a g e bevruchte z a a d k n o p p e n gaf e e n z e l f d e trend t e z i e n . B e s c h o u w t m e n a l l e g e g e v e n s é é n d a g n a de bestuiving v e r z a m e l d , dan k a n m e n s t e l l e n d a t de v e r s c h i l l e n o n g e v e e r a l s volgt l a g e n .

l a a g s t e , 1 5 /

D e t e m p e r a t u u r ( / 1 5 ) g e e f t d e l a n g z a a m s t e k i e m b u i s g r o é i ,

w a a r d o o r 1 dag na de bestuiving n a u w e l i j k s bevruchting had p l a a t s g e v o n d e n .

1 8

B i j / 1 8 w a s 1Q% " g e z e t " en waren gemiddeld 2 , 7 ^ v a n d e z a a d k n o p p e n bevrucht .

D e beste t e m p e r a t u u r was, (.^^/25) met l O O ^ z e t t i n g " en 1 1 , 4 ^ b e v r u c h t e z a a d k n o p p e n .

1 8

D e w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n l e k e n beide beter dan / 1 8 m a a r 2 5

m i n d e r dan / 2 5 .

2 5 1 5

Onderling l e e k het verschil tussen / 1 5 en / 2 5 ni8t b e t r o u w b a a r t e z i j n .

Na 2 dagen waren f e i t e l i j k a l l e v r u c h t b e g i n s e l s gezet, u i t g e z o n d e r d 2 5 ~

/ 1 5 , w a a r b i j 7 0 - 8 7 , 5 ^ w a s g e z e t ; H i e r d o o r valt a l l e e n een beoordeling van de bevruchte z a a d k n o p p e n t e g e v e n . D i t w a s

*15 *18 2 5

b i j / 1 5 e n / 1 8 o n g e v e e r g e l i j k . B i j / 2 5 w e r d e n m i n d e r bevruchte z a a d k n o p p e n g e v o n d e n dan bij de f i x a t i e na één dag e n l a g n u het l a a g s t e t e n o p z i c h t e van a l l e o v e r i g e b e h a n d e l i n g e n .

d.6

D e o o r z a a k i s o f d e m e t h o d e , w a a r d o o r d e z i c h ontwikkelen z a a d k n o p ­ pen n i e t m e e r f l u o r e s c e r e n o f a b o r t i e van d e z a a d k n o p p e n . D i t

l a a t s t e z o u dan veroorzaakt kunnen z i j n d o o r de c o n t i n u v r i j h o g e t e m p e r a t u u r , w a a r d o o r o . a . de s t e r k e a d e m h a l i n g d e z e a f s t o t i n g i n de hand w e r k t e .

_ 6

-1 5 1 5

B i j d e w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n w a s / 2 5 evengoed a l s / 1 5

1 8 2 5

en / 1 8 , m a a r / j 5 w a s m i n d e r , h e t g e e n z o w e l i n de " z e t t i n g " a l s de bevruchting n a a r voren k w a m . M o g e l i j k i s de t e m p e r a t u u r vlak

1 5

voor d e f i x a t i e van i n v l o e d . B i j / 2 5 werd altijd n â d e warme 2 5

( = a c t i e v e ? ) periode gefixeerd en bij / 1 5 d u s s t e e d s n a de k o u d e r e ( = „ r u s t e n d e " ) periode g e f i x e e r d . W e l l i c h t i s d e f l u o r e s c e n t i e bij een a c t i e f p l a n t e d e e l g r o t e r den d a a r d o o r beter h e r k e n b a a r ?

D e c o n c l u s i e na 2 dagen valt m o e i l i j k t e t r e k k e n . V e r m o e d e l i j k i s de h o o g s t e t e m p e r a t u u r c o n t i n u g e g e v e n of het m i n s t d o o r z a a d k n o p - a b o r t i e of niet betrouwbaar. H e t m e e s t gunstig t e n

1 5 1 8 1 5

a a n z i e n van z e t t i n g en bevruchting waren / 1 5 , / 1 8 e n / 2 5 , 2 5 die o n d e r l i n g niet v e r s c h i l d e n . M i n d e r l e e k nu / 1 5 , m a a r 2 5 w e l d u i d e l i j k beter dan / 2 5 . Na 3 dagen w a s d e z e t t i n g f e i t e l i j k o v e r a l 1 0 0 % , u i t g e z o n d e r d 2 5 ~

/ 2 5 . D e na 2 d a g e n i n g e z e t t e trend van een m i n d e r g o e d e

bevruchting bij deze h o o g s t e t e m p e r a t u u r , had z i c h d u s g e c o n t i n u e e r d 1 8

( 4 0 % gezet en 1 , 4 % b e v r u c h t ) . Ook bij / 1 8 w a s d e bevruchting m i n d e r n a d r i e dan t w e e d a g e n

ni

de b e v r u c h t i n g . D e bevruchting w a s nu 1 5 % ( n a 2 dagen 2 0 , 8 % ) . B i j d e l a a g s t e t e m p e r a t u u r w a s nu 2 5 , 1 % van d e z a a d k n o p p e n bevrucht. D i t w a s o n g e v e e r g e l i j k 1 5 a a n / 2 5 , dat m o g e l i j k i e t s g u n s t i g e r k o n z i j n en 2 5 , 5 % bevruchte z a a d k n o p p e n g a f . 2 5 / E v e n e e n s gaf e e n g o e d e b e v r u c h t i n g / 1 5 ( g e m i d d e l d 1 8 , 3 - 2 0 , 1 % ) . 1 5

D e z e behandeling w a s d u s gelijk of i e t s m i n d e r dan / 1 5 en 1 5/ 2 5 .

Na 3 dagen k a n men d u s s t e l l e n , dat de l a g e t e m p e r a t u u r ( 1 5 ° C c o n t i n u ) g u n s t i g e r e s u l t a t e n g a f en het p e r c e n t a g e bevruchte

1 5

z a a d k n o p p e n h i e r b i j evengoed w a s a l s b i j / 2 5 . M o g e l i j k w a s 2 5

/ 1 5 i e t s m i n d e r , m a a r dit t e m p e r a t u u r - r e g i e m w a s t o c h beter dan c o n t i n u 18°C en d u i d e l i j k beter dan c o n t i n u 2 5 ° C .

Bekijkt men a l l e u i t k o m s t e n tezamen,' dan kan m e n s t e l l e n ,

dat a a n v a n k e l i j k de s t u i f m e e l k i e m i n g s n e l l e r verloopt bij h o g e t e m p e r a t u u r ( 2 5 ° C ) h e t g e e n t o t uiting k o m t i n d e hechting en de k i e m b u i s g r o e i . L a g e r e t e m p e r a t u r e n ( 1 8 ° en 1 5 ° C ) g e v e n d u s i n e e r s t e i n s t a n t i e een g e r i n g e r e hechting en een d u i d e l i j k m i n d e r s n e l l e k i e m b u i s g r o e i . Het gevolg van de s n e l l e k i e m b u i s g r o e i

b i j d e h o g e r e t e m p e r a t u u r komt ook tot uiting i n de snellere b e v r u c h t i n g .

Na een w a t la|ngere p e r i o d e ( 2 e n 3 d a g e n na de b e s t u i v i n g ) k o m t d e h o g e r e t e m p e r a t u u r ( 2 5 ° C ) ongunstig n a a r v o r e n .

m»

7

*-D i t kan

óf

w e l een manko van d e m e t h o d e van o n d e r z o e k z i j n ,

6f

w e l i s d i t een j u i s t e w a a r n e m i n g . R o c h t d i t een j u i s t e w a a r n e m i n g betreffen,

dan i s w e l l i c h t d e s t e e d s h o g e a d e m h a l i n g / v e r b r a n d i n g d e o o r z a a k van d e z e u i t k o m s t . Na l a n g e r e tijd g e e f t c o n t i n u 2 5 ° C d u s d e m i n s t e b e v r u c h t i n g , gevolgd door 1 8 ° C c o n t i n u g e d u r e n d e 3 d a g e n . o 1 5 o C o n t i n u 1 5 C of wisselend / 2 5 C g e v e n o n g e v e e r g e l i j k e r e s u l t a t e n 2 5 o

e n deze l i j k e n beter dan / 1 5 C .

S a m e n v a t t i n g en c o n c l u s i e

Nagegaan werd de i n v l o e d van een w i s s e l e n d e t e m p e r a t u u r g e d u r e n d e d e s t u i f m e e l k i e m i n g , d e k i e m b u i s g r o e i en de b e v r u c h t i n g .

V e r g e l e k e n werd c o n t i n u 1 5 ° - 1 8 ° o f 2 5 ° C t e n o p z i c h t e van w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n van 8 u r e n : 2 5 ° C e n 1 5 u r e n : 15°C p e r e t m a a l .

Na d e bestuiving werd o f m e t 2 5 ° C o f met 1 5 ° C begonnen.

D e hoge t e m p e r a t u u r ( 2 5 ° C ) geeft a a n v a n k e l i j k een s n e l l e r e s t u i f ­ m e e l k i e m i n g , h e t g e e n t o t u i t i n g k o m t i n een betere hechting ( 5 U u r ) ; buisgroei ( 5 u u r + 1 d a g ) en s n e l l e r e bevruchting ( 1 d a g ) . D e l a g e r e t e m p e r a t u r e n ( 1 8 ° e n 1 5 ° C ) g e v e n d u s a a n v a n k e l i j k een a c h t e r s t a n d t e n o p z i c h t e van 2 5 ° C , m a a r na een l a n g e r e p e r i o d e ( 2 en 3 d a g e n ) l i j k e n de h o g e r e t e m p e r a t u r e n c o n t i n u g e g e v e n , m i n d e r gunstig t e z i j n . H e t i s e c h t e r niet h e l e m a a l z e k e r , o f d i t a a n d e b e p a l i n g s m e t h o d e m o e t worden t o e g e s c h r e v e n , dan w e l o f d i t d o o r de h o g e t e m p e r a t u u r a n s i c h m o e t w o r d e n toegeschreven ( b i j v . d o o r d e c o n t i n u hoge a d e m h a l i n g ) . B i j d e lagere, t e m p e r a t u u r ( 1 5 ° C ) blijven d e k i e m b u i z e b d o o r g r o e i e n en geven een g e l e i d e l i j k e t o e n a m e van d e bevruchting t e z i e n , e v e n a l s

1 5 o b i j / 2 5 h e t g e v a l w a s . Na d e bestuiving eerst 2 5 e n d a a r n a 15°C g e v e n , v e r o o r z a a k t v e r m o e d e l i j k een a a n v a n k e l i j k v e r b e t e r d e k i e m i n g e n d a a r m e e h e c h t i n g , m a a r i s n a l a n g e r e tijd m o g e l i j k i e t s t o t d u i d e l i j k m i n d e r dan 1 5 / 2 5 . D e s l o t c o n c l u s i e i s v o o r l o p i g d e z e , 1 5 2 5 d a t / 2 5 e n / 1 5 o n g e v e e r g e l i j k e r e s u l t a t e n g e v e n . M o g e l i j k werd b i j / T 5 / 2 5 s o m s betere r e s u l t a t e n v e r k r e g e n , o m d a t d e z e behandeling s t e e d s gefixeerd werd na d e " w a r m e " ( = a c t i e v e ? ) p e r i o d e , w a a r d o o r w e l l i c h t een betere f l u o r e s c e n t i e werd v e r k r e g e n . W e l bleken d e u i t e i n d e l i j k e u i t k o m s t e n m e t d e w i s s e l e n d e t e m p e r a t u r e n z e k e r niet m i n d e r t e z i j n d a n c o n t i n u 1 8 ° C .

- 8 -Bijlage 1 S a m e n s t e l l i n g van de g e b r u i k t e voedingsbodem U i t g e b r e i d e K n o p s v o l g e n s Nitsch C a ( N 03)2. 4 H20 5 0 0 m g / l i t e r

KNO

3 1 2 5 m g / l i t e r Mg S 04. 7 H20 125' m g / l i t e r

KH

2

PO

4 1 2 5 m g / l i t e r F e d t a 3 m g / l i t e r T h i a n i n s ( a n e m i n e - h y d r o c h l o r i d e ; Vitamine B^ 1 m g / l i t e r L . c y s t e i n e - h y d r o c h l o r i d e 1 0 m g / l i t e r S a c c h a r o s e 5 0 m g / l i t e r

P e r l i t e r van bovengenoemde o p l o s s i n g 1 m l van o n d e r s t a a n d e o p l o s s i n g I I

H

2

SO

4

.

s . g . 1 , 8 3 PlnS04. 4 H20 Z n S 04. 7 H20 H3B G3 CuSO,* 5 H 0 4

2

Na M o 0 . 2 H20 0 , 5 m l / l i t e r 3 . 0 0 0 m g / l i t e r 5 0 0 m g / l i t e r 5 0 0 m g / l i t e r 2 5 m g / l i t e r 2 5 m g / l i t e r pH = 4 , 2 Bodem s t o l l e n met 1 5 g / l B a c t o a g a r . S t e r é l i s e r e n : 1 5 m i n u t e n o p 1 a t m o s f e e r . R e g e l i n g l u c h t v o c h t i g h e i d m e t een m e n g s e l van H20 : g l y c e r i n e a l s 3 6 î 6 4 .

_ g _ Bijlage 2 W e r k s c h e m a M a a n d a g 6 a p r i l 1 9 7 0 : B l o e m k n o p p e n verzameld van t r o s 1 0 - 11 e n 1 2 t u s s e n 0 9 . 0 0 - 1 0 . 0 0 u u r ( i n v o c h t i g e p e t r i s c h a l e n ) D a a r n a g e c a s t r e e r d en op eBn voedingsbodem g e p l a a t s t T o t de volgende d a g bewaard b i j k a m e r t e m p e r a t u u r e n h o g e l u c h t v o c h t i g h e i d . D i n s d a g 6 a p r i l 1 9 7 0 . S t u i f m e e l verzameld t u s s e n 0 8 . 0 0 - 0 8 . 2 0 u u r S t u i f m e e l w a s a f k o m s t i g van t r o s 9 - 1 0 e n 11 B e h a n d e l i n g e n 1 - 2 - 4 en 5 t u s s e n 0 8 . 2 0 - 0 9 . 0 0 bestoven

Gefixeerd om 1 4 . 0 0 u u r : 1 0 bloemen van behandelingen 1 - 2 - 4 e n 5» B e h a n d e l i n g 3 o m 1 6 . 2 0 - 1 6 . 3 O u u r "bestoven '" \ B e h a n d e l i n g e n 2 en 3 om 1 6 . 3 0 u u r n a a r 1 5 ° C G e f i x e e r d om 2 1 . 3 0 u u r : 1 0 bloemen van b e h a n d e l i n g 3 In vitro i n g e z e t r e s p e c t i e v e l i j k 1 0 . 0 0 e n 1 6 . 3 0 u u r t o t r e s p e c t i e v e l i j k 1 5 . 0 0 e n 2 1 . 3 0 u u r W o e n s d a g 8 a p r i l 1 9 7 0

0 8 . 3 0 u u r f i x e r e n : 1 0 bloemen van behandeling 1 - 2 - 4 e n 5 0 8 . 3 0 u u r behandeling 2 en 3 n a a r 25°C

1 6 . 3 0 u u r f i x e r e n : 1 0 bloemen van behandeling 3 16.30 u u r behandeling 2 en 3 n a a r 15°c D o n d e r d a g 9 a p r i l 1 9 7 0 A l s op w o e n s d a g , 8 a p r i l 1 9 7 0 Vrijdag 1 0 a p r i l 1 9 7 0 A l s o p w o e n s d a g e n d o n d e r d a g . Kieming i n vitro ( 7 % s u i k e r + 0,007% H g B O g i n d e m i w a t e r ) 1 0 . 0 0 u u r i n g e z e t 2 1 . n . b . 2 9 . l . b . 1 2 . k . b . 1 6 . n . b . 1 8 . n . b . 1 5 . n . b . 1 8 . n . b . 1 3 . n . b . 7 . k . b . 1 4 . n . b . 1 6 . n . b . 3 . n * b. 1 1 . n . b . 1 8 . n . b . G e m i d d e l d : 1 5 , 1 % 167~30 u u r i n g e z e t 2 . k . b . 1 1 . n . b .

2.

k . b . 1 0 . n . b . 3 . k . b . 9 . n . b . 1 7 . l . b . 5 . n . b . 1 . ' k . b . 0 7 . 5 . n . b. n . b . G e m i d d e l d : 6,0%

1 0 -Bijlage 3 K a s : 3 vakken s e r i e - t h e r m o s t a a t G s u a s : P I . 2 k a s t o m a t e n b l o e m e n . maximum/minimum t h e r m o m e t e r : 4 6 - 5 2 - 7 8 c h e m . thermosie.teir : 2 8 - 1 4 - 2 1 5 ° C 1 8 ° C 2 5 ° C

1 1 -Bijlage 4 M o d ± f ± c a t i e _ va n een r e c e g t v o l g e n s K h o , Y . O . & B ä e r ^ 3 . Euphytica:, N e t h . O . o f P l a n t Breeding I . U . T . V o l . 1 7 N o . 2 O k t . 1 9 6 8 b l z . 2 9 8 - 3 0 2 . O b s e r v i n g pollen t u b e s by m e a n s o f f l u o r e s c e n c e F i x e r e n i n F . A . A . 5 0 g e d u r e n d e m i n s t e n s 2 4 u u r bij k a m e r t e m p e r a t u u r . H y d r o l y s e r e n i n 1 N NaOH g e d r u e n d e 1 u u r b i j k a m e r t e m p e r a t u u r . U i t w a s s e n i n a q u a d e s t . ( 5 à 7 w a s s i n g e n ) . K l e u r e n i n k l e u r s t o f bestaande uit 0 , 1 ^ a n i l i n e - b l a u u i n 0,1 N P O ^ g e d u r e n d e 1 n a c h t . W o r d t h e t m a t e r i a a l n i e t d i r e k t d e d a a r o p v o l g e n d e d a g g e b r u i k t , dan i n e e n k o e l k a s t i n d e k l e u r s t o f beuaren ( t e m p e r a t u u r +_ 4°c). P r e p a r a t e n m a k e n . Z a a d k n o p p e n o n d e r b i n o c u l a i r u i t p r e p a r e r e n ( v e r g r . 1 6 o f 2 0 x ) . S t i j l en z a a d k n o p p e n a p a r t i n s l u i t e n i n g l y c e r i n e P r e p a r a t e n z i j n c i r c a één w e e k h o u d b a a r bij een k a m e r t e m p e r a t u u r ; b i j l a g e t e m p e r a t u u r ( 4 ° C ) l a n g e r . T é l l e n m e t vergroting 1 2 5 x v o o r s t u i f m e e l en 5 O x v o o r z a a d k n o p p e n . F i l t e r k o m b i n a t i e 2 i s h e t b e s t e . O c u l a i r - m i c r o m e t e r g e b r u i k e n i n verband m e t h e t v o o r k o m e n van f o u t e n b i j het t e l l e n .

1 2 -B i j l a g e 5 blz.1 S t u i f m e e l t o t a a l L e n g t e buis x L e n g t B s t i j l x Z a a d k n o p p e n t o t a a l e m b r y o B e h a n d e l i n g 1 F i x e r e n n a 5 u u r ; c o n t i n u 1 1 4 6 1 7 7 6 5 4 2 1 0 2 1 1 8 4 5 3 3 7 8 8 8 5 5 5 4 1 2 7 1 3 5 1 5 0 5 2 8 4 3 5 6 1 , 5 5 3 6 1 1 8 1 4 7 2 4 6 7 6 1 2 0 , 5 4 3 8 1 3 2 1 9 6 0 , 5 51 9 7 5 9 4 2 6 0 1 0 3 3 4 3 1 4 3 T o t a a l 1 . 1 0 1 1 . 3 6 6 2 3 , 5 x 1 0 0 0 5 0 8 . 0 0 0 8 0 ü 80 /ü G e m i d d e l d 2 9 4 6 . 3 5 0 Z o n d e r 1_ 1 0 9 5 1 3 5 4 2 3 0 0 0 465-000 1 22 1 5 0 7 2

IT

Behandeling. 2 F i x e r e n na 5 u u r ; 8 u u r 1 1 1 5 141 7 5 3 2 1 6 8 1 8 9 7 5 0 3 1 8 3 231 8 4 0 4 1 8 8 2 3 8 5 5 3 5 9 7 1 3 3 4 5 4 6 2 3 0 2 7 2 1 3 5 4 7 . 1 6 4 2 1 5 8 4 0 8 1 7 0 1 9 5 8 4 3 9 2 7 0 3 2 3 1 6 6 0 1 0 1 3 7 1 6 8 6 5 5 T o t a a l 1 7 2 3 2 1 0 5 8 2 0 0 0 5 0 2 . 0 0 0 8 u u r 2 5QC e n 1 6 u u r 1 5 ° C Gemiddelçi B e h a n d e l i n g 3 102§°/U _{5 2 7 5 8 0/U}

o

g F i x e r e n na 5 u u r 8 u u r 2 5 C e n 1 6 u u r 1 5 C 1 2 3 6 '302 1 6 0 2 7 0 8 6 1 5 0 3 1 9 5 2 3 6 1 51 4 3 8 6 3 1 51 5 4 0 6 4 0 , 5 4 2 6 . 8 51 0 , 5 5 4 7 6 9 8 3 0 , 5 4 8 8 5 7 8 7 1 4 2 9 8 6 61 0 , 5 6 0 1 0 3 2 6 3 1 . 6 3 t a a l 781 1 0 9 6 8 0 0 0 5 2 1 . 0 0 0 Gemiddeld Z o n d e r 6 7 7 3 1 0 4 5

86

116

80 .U

100

7 5 0 0 0 8 0 A J 6 5 1 3 4 6 7 . 0 0 0 7 2 7 2

—'' 1 & — B i j l a g e 5 b i z . S t u i f m e e l L e n g t e Lengte' Z a a d k n o p p e n buis s t i j l + t o t a a l x 1/8 x 1/8 + t o t a a l e m b r y o B e h a n d e l i n g 4 F i x e r e n n â 5 uur continu 15°C 1 7 6 1 0 4 5 5 2 8 5 121 1 _• 5 5 O 4 1 8 8 8 0 , 5 5 2 5 9 4 1 2 6 1 5 6 6 1 2 3 2 0 , 5 4 0 7 51 7 2 2 5 5 8 71 1 2 7 1 4 2 9 9 0 1 7 8 3 5 5 1 0 6 2 6 1 4 8 T o t a a l 5 0 3 8 7 4 1C !. 5 0 0 7 2 /ll 4 5 8 . 0 0 0 7 2 AJ G e m i d d e l d 1 4 6 6 . ,361 B e h a n d e l i n g 5 F i x e r e n na 5 uur continu 25°C 1 1 6 2 1 9 4 9 6 0 2 1 8 2 2 1 2 1 0 5 2 3 i 55 1 9 8 9 .53 4 8 5 101 7 5 0 5 1 6 9 251 3 4 6 6 6 0 7 2 8 5 2 7 141 2 0 2 1 0 5 0 8 1 4 4 181 6 5 0 9 83' 1 0 7 4 41 1 0 1 8 5 2 0 6 1 0 5 7 T o t a a l 1 3 6 6 1 7 2 4 7 6 . 0 0 0 511.000 G e m i d d e l d 8 0 / U 9 5 0 8 0 / U 6 . 3 8 8 B e h a n d e l i n g 1 F i x e r e n na 1 d a g continu 1 8 ° C 1 1 0 5 1 1 8 6 0 6 0 0 1 4 3 0 2 1 7 8 191 5 3 5 3 2 2 1 6 8 0 3 7 3 8 2 5 0 5 2 0 131 0 4 1 2 3 1 3 7 4 5 4 5 0 1 4 6 0 5 8 2 9 0 4 7 4 7 7 1 3 7 0 6 2 0 6 ' 2 1 4 6 0 6 0 1 2 2 4 0 7 1 1 8 1 3 2 5 3 5 3 3 1 2 4 0 8 2 2 4 2 4 5 5 5 5 5 2 . 1 8 8 0 9 1 5 9 1 7 7 4 8 4 8 3 1 3 9 0 1 0 1 6 0 1 8 7 5 0 5 0 5 1 7 7 0 T o t a a l 1 4 2 8 1 5 7 3 5 2 1 . 0 0 0 523.000 4 3 1 . 5 7 7 0 G e m i d d e l d 6 8 0 / U . 5 1 3 6 . 8 0 / U 5 3 $

- 1 4 - Bijlage biz. 3

S t u i f m e e l L e n q t e Z a a d k n o p p e n

+ t o t a a l buis s t i j l + t o t a a l e m b r y o

x 1 / 8

B e h a n d e ling 2 F i x e r e n n a 1 dag 8 u u r : 2 5 ° C en 16 uur

1 1 5 9 1 7 7 5 2 5 2 9 1 3 6 0 2 2 1 5 2 3 5 6 0 6 0 1 8 171 0 3 8 5 9 3 59 59 4 3 1 1 6 0 4 1 9 5 2 1 4 5 3 5 3 2 2 1 9 0 0 5 1 0 1 1 0 0 , 5 5 7 0 1 4 7 0 6 1 3 3 1 4 9 4 3 4 3 1 1 4 9 0 7 131 1 4 3 5 2 5 2 11 1 2 6 0 8 1 4 8 1 6 4 5 3 5 3 2 1 0 2 0 9 9 8 1 1 3 4 2 4 2 0 1 1 4 0 1 0 1 7 4 2 0 4 4 5 4 5 2 1 5 3 0 T o t a a l 1 3 4 8 1 6 0 2 4 5 9 . 5 0 0 5 1 6 . 0 0 0 1 0 8 1 4 0 4 0 Z o n d e r 5 1 3 3 8 1 4 9 2 G e m i d d e l d 1 4 9 1 6 6 80^11 4 5 9 . 0 0 0 80, U 459'. 0 0 0 7 2 5 7 4 4 6 3 7 5 7 2 6 4 5 0 6 3 7 5

108

1 2 1 2 5 7 1 4 0 B e h a n d e l i n g 3 F i x e r e n n a 1 d a g 8 u u r 2 5 ° C e n 1 6 u u r 1 5 ° C 1 1 2 6 1 9 5 5 0 5 0 2 1 1 3 1 3 2 51 51 3 1 1 2 1 3 8 5 8 5 8 4 1 0 7 1 4 7 5 3 5 3 5 111 1 3 6 6 0 6 0 6 1 0 3 1 2 9 4 5 4 9 7 1 0 6 1 9 4 4 9 4 9 8 8 6 9 9 4 0 4 0 ' 9 1 5 3 2 3 3 5 5 5 5 1 0 1 0 4 6 2 5 4 T o t a a l 1 0 2 7 1 4 4 9 4 6 3 . 0 0 0 8 0 XU 5 1 9 . 0 0 0 8 0 / U Z o n d e r 1 0 1017 1 4 0 3 461.000 465.000 7 2 / U 7 2yU 6 4 8 8 6 4 5 8 G e m i d d e l d 1 1 3 1 5 6 5 7 8 8 6 4 0 3 7 2yU 6 4 8 8 6 4 5 8 3 0

1 8

2 9

8

1 5 1

1 0

2

22

0 1 3 5 1 6 7 1 7 0 1 4 6 1 3 7 1 5 9 1 4 4 1 3 4 1 8 4 1 4 5 2 0 5 1591 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 z a a d k n o p p e n fluor­ e s c e r e n 1 3 5 138-6 1 5 1 5 4 B e h a n d e l i n g 4 F i x e r e n n a 1 d a g c o n t i n u 1 5 ° C 1 1 1 0 1 1 9 4 0 4 6 0 1 2 8 0 2 131 1 5 7 4 5 4 5 0 2 1 7 0 3 1 1 0 • 121 5 0 5 5 0 1 1 3 0 4 111 1 3 3 4 4 5 2 0 1 5 3 0 5 141 1 6 3 4 0 4 4 1 201 0 6 1 7 2 1 8 6 4 9 4 9 * 0 1 5 8 0 7 1 2 6 1 3 2 41 5 2 0 1 6 6 0 8 1 3 7 1 5 2 3 0 6 2 0 1 2 3 0 9 1 9 7 2 4 3 2 9 5 6 0 : 135 0 1 0 T o t a a l 2 3 5 / 9 1406/9 368000 461000 1 3 4 9 4 / 9 G e m i d d e l d 7 2 7 2 1 1 3 7 1 5 6 511 6 4 0 3 1 5 5

1 5 -o 0 3 H-a a 0 m a o ci* CD û) I—' CD CD 4!s en en CO N) • a _•C* en V. en CD O o o o en en • CD N) en O -£s en \ • a cz a o a CD KD CD a\ en oa M CD CTi CD -n3 en 4^ «O -O en CD KD UD OD CO U3 ^ i KD N) _i. ~jk -o •Cs CD N> en CD O LA CD i a en CD en LA KD •N3 en O o en

CTÏ

en o o -> -j -o •fs O 4^ O ND LA o a o en en 4^ o en £> en en en o o a\ en o o en en en en en -sa ro LA

£s

en en ND en en i -i 1 K> CD ro -0 en en O -0 LA -N3 KD CD o •f* -Ês LA -j. o KO ND o o cr D* O* o O O <c < < CD CD CD 3 3 3 03 D) 03 03 0) CD 3 3 3

E

UD ID CD CD CD H- CD CD 3 3 3 F-UD ~t> -13 H* l—' -15 C C H» O o C O CD CD

ti

0) CO (D n o CO CD CD O 3 3 CD

et et

3 H* H«

et

CD CD p. CD 3 tx e 0) o CD

et

c: H* H-(0 3 UD 3 H* 03 UD H) û) M 3 -*) C h-» O UD C n CD O cd CD 03 3

ro

o CD © -U o 3 H» CD rt- C 3 H« O et* CD 1-J H-© 0 05 G • CD 3

et

p. CD <•

*1

CD CO Ci" CD CD

zr

03 3 CL CD _H» H« 3 UD en !\ 3 03 CL 03 UD O O 3 rr H* 3 C hO en H* X CD h* CD 3 +

Cf)

_et

C H-3 et" CD O 0 et* H4 D) 03 M cr c H* r~ 0) o X 3 UD —À

et

0 atï-H* C-.. M + M û) 0) Q. TT

et

3 O O cf "O 03 TD 0) m h-» 3 CD 3 er *< o CD W* c_.. H* D) UD CD en er h-« N

1 6 -B i j l a g e J T b l z . 5 Lenqte Zaadknopp en buis stijl + t o t a a l e m b r y o x 1 / 8 x 1 / 8 Behandeling 1 na 2 d a g e n c o n t i n u 1 8 ° C 1 59 59 2 6 1 8 4 0 bovenaan weinig f l u o r e s c e n t i e r e s t goed f l u o r e s c e n t i e 2 5 2 5 2 1 0 1 7 5 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e 3 4 8 4 8 1 1 5 8 0 s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 4 5 5 5 5 7 6 1 7 6 0 bovenaan w e i n i g - , rest s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 5 61 61 4 0 140 1 i d e m 6 6 0 6 0 3 8 1 2 2 0 idem 7 5 3 5 3 3 7 2 1 2 0 s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 8 51 51 6 1 2 5 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e 9 5 5 5 5 7 8 1 6 3 1 bovenaan weinig f l u o r e s c e n t i e r e s t s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 1 0 5 7 5 7 31 1 9 2 0 idem T o t a a l 5 5 1 . 0 0 0 5 5 1 . 0 0 0 3 4 3 1 6 4 7 2 8 0yU 8 0 / U Gemiddeld 6 . 8 8 8 /

B e h a n d e l i n g 2 F i x e r e n n a 2 dagen 8 uur 2 5 C en 1 6 uur 15°C

1 5 0 5 0 2 8 1 7 8 3 bovenaan w e i n i g , rest g o e d e f l u o r e s c e n t i e 2 5 2 52 11 221 0 bovenaan z e e r weinig f l u o r e s ­ c e n t i e ; rest z e e r m a t i g " 3 5 0 5 0 2 4 2 0 3 0 bovenaan z e e r w e i n i g , rest r e d e l i j k f l u o r e s c e n t i e 4 56 56 2 1 5 2 0 bovenaan geen, r e s t z e e r m a t i g f l u o r e s c e n t i e 5 1 2 5 2 0 161 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e 6 3 0 50 1 111 0 i d e m 7 5 5 5 5 8 1 9 2 0 bovenaan geen , r e s t s l e c h t e f l u o r e s c e n t i e 8 4 8 4 8 1 3 221 0 bovenaan z e e r w e i n i g , rest r e d e l i j k f l u o r e s c e n t i e 9 5 2 5 2 0 1 7 7 0 z e e r matig f l u o r e s c e n t i e 1 0 1 3 3 .0 181 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e T o t a a l 4 0 6 . 0 0 0 498.000 8 7 1 . 7 9 7 3 Z o n d e r * 1 n 8 0 / U 8 0 /J Z o n d e r * 1 n T I CJ 53 9 3 . 0 0 0 413.000 87 1 . 4 5 5 6 4 Al 6 4 yU Gemiddeld 6 4 yU 5 . 0 7 5 6 . 2 2 5 6.141 6 . 4 5 3 11 1 8 2

1 6 -B i j l a g e ^ b l z . 5 L e n g t e Z a a d k n o p p e n buis s t i j l t o t a a l e m b r y o x 1 / 8 x 1/8 Behandeling 1 na 2 d a g e n continu 1 8 ° C 1 59 59 2 6 1 8 4 0 bovenaan weinig f l u o r e s c e n t i e rest goed f l u o r e s c e n t i e 2 5 2 52 1 0 1 7 5 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e 3 4 8 4 8 1 1 5 8 0 s t e r k e f l u o r e s c e n t i e

4 5 5 . 5 5 7 6 1 7 6 0 bovenaan weinig - , rest s t e r k e

f l u o r e s c e n t i e 5 61 61 4 0 140 1 i d e m 6 ' 6 0 6 0 3 8 1 2 2 0 idem 7 5 3 5 3 3 7 2 1 2 0 s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 8 51 51 6 1 2 5 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e 9 5 5 5 5 7 8 1 6 3 1 bovenaan weinig f l u o r e s c e n t i e rest s t e r k e f l u o r e s c e n t i e 1 0 5 7 5 7 31 192 0 idem T o t a a l 5 5 1 . 0 0 0 551.000 3 4 3 1 6 4 7 ₂ 8 0 yU 80/1! Gemiddeld 6 . 8 8 8 80/1! Behandeling 2 F i x e r e n na 2 dagen 8 u u r 2 5 ° C en 16 u u r 15°C 1 5 0 5 0 2 8 1 7 8 3 bovenaan w e i n i g , rest g o e d e f l u o r e s c e n t i e 2 5 2 5 2 11 221 0 bovenaan z e e r weinig f l u o r e s ­ c e n t i e ; r e s t z e e r m a t i g " 3 5 0 5 0 2 4 2 0 3 • 0 bovenaan z e e r weinig, r e s t r e d e l i j k f l u o r e s c e n t i e

4 5 6 56 2 1 5 2 0 bovenaan geen, rest z e e r m a t i g

f l u o r e s c e n t i e

5 1 2 52 0 161 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e

6 3 0 5 0 1 111 0 i d e m

7 5 5 5 5 8 1 9 2 0 bovenaan geen , rest s l e c h t e

f l u o r e s c e n t i e 8 4 8 4 8 1 3 221 0 bovenaan z e e r w e i n i g , rest r e d e l i j k f l u o r e s c e n t i e 9 5 2 5 2 0 1 7 7 0 z e e r matig f l u o r e s c e n t i e 1 0 1 3 3 0 181 0 z e e r weinig f l u o r e s c e n t i e T o t a a l 4 0 6 . 0 0 0 498.000 8 7 1 . 7 9 7 3 8 0 / U 53 9 3 . 0 0 0 8 0 /J Z o n d e r + 1 0 8 0 / U 53 9 3 . 0 0 0 413.000 87 1 . 4 5 5 Z o n d e r + 1 0 6 4 , tl »ld 5 . 0 7 5 6 4 / J 6 . 2 2 5 Gemidde 6 4 , tl »ld 5 . 0 7 5 6 4 / J 6 . 2 2 5 6.141 6 . 4 5 3

11

1 8 2

- 17

CD CD 3 O F-CL CL CD H» CL M O 3 a CD O et" © Û) f—' lai • ^ û C O - O C T i a i ^ W M -JiCO Cn en NDÎ* ' • • ' îo en un en en en CT) W •sj en en ND • • en en cr en en en ca jo -j ro œ • Q o \ O c O

!

• cncncn-^-pN-pNcnc^cncn o u c A O ^ i û o a i a i o c o u o O en N) en • encnoi-fs^^cncnenen o u o i o ^ i o o t n a i a a w o a ro Ü4 en LA

—à

-0 a œ CD ho o i LA •ÊN en i en en -s3 O

LA

-s3 CD en -0

LA

O

KD

CD O O O O O O a o o O © © © CT © © UD lO to ID ci" ci" Ci- O ci* ci" o O o O

© © © < © © © CD © © hJ »-* \ri © t-j CL a. CL CL 7\ 7T 7\ 3 X" TT © © © © © © © © © © © 3 03 ci" CD i-J 7\ CD C O CD CO o CD 3 cl" F* © -O ho -3- —^ -j» w en en en -o kd ro CD en H © © O 3" 3 ci* © H* © 3 CL © CL CL F1 © © F» M p. CL en 3 •fs UD CO <£> •> a • • V o œ c: o en a GJ en co kO ~n o • H. s s. a X CZ o © o «-J © 3 3 w © œ CD N3 a © UD © 3 -0 i O "UD O 3 Ci* H» 3 O o ^ û O D - o o i û i ^ w r o cncncnencnencnencncn o - j œ c n a ^ a u i w w en en en en en en o >j œ en a -o en o n c o rç CD CO a CD 3 ci* F« œ O" cr O cr o o 3 o < c CL < © © © © 3 3 3 '© © © © © © © © 3 3 3 3 F* F- © F* © © F* ©

et-

ci* © ci"

© © O © 3" 3 3 :.cî* 3 H» F» © F-3 F-3 3 a. CL CL © © © hl »-i

—fi

F» C s 3 O © © o © 3 ci" F» © CD CD o CD • Ci* H* CD o a UD -O -0 en m N) .£>. CO :> —^ ^ hO ^ JS-i o ai w cr cr o o < < CD © 3 3 03 03 Û3 03 3 3 ID N CD © cr cr cr cr CD © © CD 3 3 3 3 03 03 O © 4 < © H' H C_i. © © UD UD UD O O O © © © a a a L D L Û E l û C D C D C D e : 03 03 03 03 3 3 3 3 © © Q © © © © © H* © U 1-1 D 3 e © F« 3 ; H. Lû 3 3 H» IQ *• >• >• «• _{* *} s* _s

-cr f-j -cr -cr *-$

n

n

cr cr hi o © o o © © © © © © o o © < © < < © © © © © © c < © © ci" © © ci" ci* d" ci* Ci* ci* © © ci*

3 3 3 3 3 © cr © © N _{UD UD 3 UD UD} © © to © o © © © O O © O O © © O 3 c 3 3 © © © ci" © © 3 3 © © a a F* a Q. _a H- 3 F- H- © © LO © © F- F* © © © © © © © © ©

ci" _© Ci* ci- F» ci* ci*

© 3 © © © © © F* O C 3 H-_{3 3} 3" 3 3 O H. © F* F* et" F* p. »-J 3 ci* 3 3 _© 3 3 © a © CL CL CL CL © © © © © © o 3 >1 © H» 3 3

~t>

ct* CL M FJ F* © C C © - O O t-J © 03 a © 3 c+ p. © en © 3* 03 3 CL © F» F-3 lO oa en en en en o en w w î\> —i —ii, -«J —* -0 en 4^» cd en ^ en co co -N] o o o o o a o o o o o N < cr o < © 3 © © 3 © F* 3 F» UD "i) M : C O © © O © 3 ci" F* © © 3 en o n F» X © *1 © 3 3 © ro a © UD © 3 CD C C ro en o n X cr

c

\ F- r-CD © _© 3 JD ci* X © © ci* Fr \C-4. CD F» + M © © CL /N d" 3 O O ci" •a © 13 © © FJ 3 © 3 cr se O o 3 © O 3" «•* H* L_.. < p. 3 La -+> F-* C O © © o © 3 et" H. © CD F« © UD © en cr M N en

1 8 -Bijlage 5 biz.7 Lenqte Zaadknoppen F l u o r e s c e n t i e buis s t i j l + t o t a a l embryo X 1 / 8 x 1/8 Behandeling 5 F i x e e r na 2 dagen c o n t i n u 2 5 C

1 5 2 5 2 4 1 5 5 0 bovenaan geen, rest z e e r s l e c h t e

2 6 2 6 2 6 221 0 praktisch geen 3 6 0 6 0 6 1 4 5 0 z e e r s l e c h t e 4 5 0 5 0 5. - 2 0 2 0 z e e r s l e c h t e 5 6 2 6 2 4 1 7 7 0 z a e r s l e c h t e , bovenaan gaan 6 5 7 5 7 1 1 8 5 0 z e e r s l e c h t e 7 5 0 5 0 .0 1 8 2 0 z e e r s l e c h t e 8 4 6 4 6 1 4 1 3 5 0 z e e r s l e c h t e , bovenaan geen 9 5 0 5 0 9 139 0 z e e r s l e c h t e , bovenaan geen 1 0

ft)

6 0 1 199 0 a ) niet t e meten T o t a a l 4 8 9 0 0 0 5 4 9 0 0 72U a o/ u 5 0 1 . 7 4 0 0 Z o n d e r 4 8 9 0 Ö 0 489000 1 0 71 U 7 2 /{J 6 . 8 6 3

i

i

_{6 . 7 9 2}

Behandeling 1 F i x e r e n na 3 dagen continu 18°C

1 5 0 5 0 4 1 8 6 0 bovenaan g e e n , rest s l e c h t e 2 4 8 4 8 6 2 1 9 2 0 bovenaan w e i n i g , r e s t g o e d e 3 5 3 5 3 2 0 1 7 9 0 g o e d e 4 5 0 5 0 0 1 6 7 0 bovenaan w e i n i g , o n d e r a a n reder-l, 5 5 0 5 0 1 2 149 0 z e e r goede, bovenaan l i j k -i e t s m -i n d e r 6 5 6 5 6 4 3 1 9 7 2 z e e r g o e d e , bovenaan i e t s m i n d e r 7 5 5 5 5 6 8 1 7 7 0 z e e r g o e d e , bovenaan i e t s m i n d e r 8 5 4 5 4 2 6 1 6 5 0 g o e d e , bovenaan i e t s m i n d e r 9 5 0 5 0 2 0 171 0 g o e d e , bovenaan i e t s m i n d e r 1 0 5 0 5 0 6 1 5 6 0 s l e c h t e T o t a a l 5 1 6 0 0 0 516000 8 0 U 8 0 U 261 1.739 2 Gemiddeld 6 . 4 5 0

Behandeling 2 Fixeren na 3 dagen 8 uur 25 ° C en 1 6 u u r 15°C

1 6 0 6 0 61 1 3 0 0 z e e r goede, bovenaan i e t s m i n d e r 2 5 0 5 0 8 199 2 m a t i g , bovenaan i e t s m i n d e r 3

ft)

5 0 0 1 4 7 0

k)

niet t e meten 4 6 0 6 0 3 2 2 0 6 S z e e r g o e d e 5 52 5 2 6 8 1 7 5 1 bovenaan geen, o n d e r a a n g o e d e 6 6 0 6 0 4 7 1 8 8 0 bovenaan z e e r weinig, o n d e r a a n z e e r g o e d s 7 5 2 5 2 31 1 4 0 1 z e e r weinig 8 4 7 4 7 1 0 161 0 goede' 9 4 9 4 9 13 1 9 5 1- m a t i g e 1 0 6 0 6 0 3 8 1 4 2 1 z e e r goede, bovenaan (_+ 2 0 ) T o t a a l 4 9 0 0 0 0 540000 weinig 7 2 , U 8 0 /U 3 0 8 1 . 6 8 3 7 Z o n d e r 490*000 490'00Q 3 7 2

M

7 2XU 3 0 8 1 . 5 3 6 7 Gemiddeld 6 . 7 5 0 6 . 8 0 6 6 . 8 0 6 3 4 171

- 19 - B i j l a g e 5 biz. 8

L e n g t e Z a a d k n o p p e n

buis s t i j l + t o t a a l embryo F l u o r e s c e n t i e x 1/8 X 1/8

Behandeling 3 F i x e r e n na 3 dagen 8 uur- 2 5 ° C en 1 6 uur 1 5 ° C

1 6 8 6 8 3 2 138' 5 goede, bovenaan _+ 2 5 x 1 / 8 ) weinig 2 59 59 58. 1 6 2 z e e r g o e d e d o o r g e h e l e s t i j l + s t e m p e l 3 5 3 5 3 2 8 1 7 0 0 g o e d e , bovenaan (_+ 1 5 x ^ ) w e i n i g 4 52 5 2 4 3 159 0 g o e d s 5 5 8 5 8 3 6 1 5 6 1 z e e r g o e d e 6 6 2 6 2 3 2 1 4 0 0 z e e r goede, bovenaan(_+18x^>)weinig 7 3 8 1 6 6 0 z e e r goede, bovenaan(_+18x^>)weinig

8 4 5 4 5 1 7 1 9 4 0 i n het midden goede, o n d e r a a n

9 6 3 6 3 7 2 1 5 8 0 weinig m i n d e r 1 0 5 0 5 0 5 6 1 6 7 0 g o e d e T o t a a l 5 1 0 0 0 0 5 1 0 0 0 0 7 2

JJ

7 2 .U 4 1 2 1 . 6 1 0 7 Gemiddeld 7 . 0 8 3 7 . 0 8 3 B e h a n d e l i n g 4 F i x e r e n na 3 d a g e n . continu 1 5 C „ R-0~ 1 6 0 6 0 31 1 5 0 0 z e e r s t e r k e 2 5 0 5 0 3 0 1 4 4 0 g o e d e , bovenaan i e t s s t e r k e r 3 5 2 52 4 4 1 5 0 1 s t e r k e dan o n d e r a a n 4 6 0 6 0 5 6 1 5 0 0 S t e r k e 5 5 3 5 3 7 9 2 1 6 0 z e e r s t e r k e 6 5 3 5 3 2 4 1 6 5 0 g o e d e 7 5 3 5 3 41 1 7 3 0 s t e r k e 8 6 0 6 0 51 1 7 2 0 s t e r k e 9 5 0 - 5 0 3 9 1 6 0 0 g o e d e 1 0 4 8 4 8 2 4 1 9 2 , 0 m a t i g e T o t a a l 5 3 9 0 0 0 5 3 9 0 0 0 8 0 / •U 8 0 A l 8 / 4 1 9 1 . 6 7 2 1 Gemiddeld 6 . 7 3 8 0 A l 8 / B e h a n d e l i n g 5 F i x eren na 3 dagen c o n t i n u 2 5 ° C 1

ft

6 4 9 1 7 9 0 ft) n i e t t e m e t e n 2 ft . 5 5 0 2 1 7 0 3

ft

5 0 0 1 4 6 0 4

ft

5 2 0 1 9 0 0 5 4 8 4 8 1 3 -140 o n d e r a a n 3 x J> r e d e l i j k e 6

ft

5 5 0 2 0 3 0 7

ft

6 0 0 1 7 0 0 8

ft

6 4 1 1 7 0 0 9

ft

5 8 2 1 7 5 0 1 0

ft

6 0 0 2 0 5 0 T o t a a l 5 6 6 0 0 0 2 5 1 . 7 9 5 0 8 0 G e m i d d e l d

'/>

7 . 0 7 5

blad 1

:en- gezet Zaadkrioppon Aantal Percentages

%

cmbr.Pnr y.b.

î + totaal embr. \/.b, + embr. t.o.u. + totaal

be s t ( + )

j 0 niet geteld; niet bevrucht

5 0 i 0 5 0 ! 0 > 0 7 4 3 1 5 7 7 0 1 0 2 , 7 0 0 4 158 8 1 0 8 1 4 0 4 0 1 0 7 , 7 0 0 11 1 4 0 9 1 3 5 1591 0 1 0 8 , 5 0 0 1 4 159 1 1 1 3 9 4 0 9 < 0 , 1 0 0 0 1 5 5 1 0 181 1 5 8 5 0 1 0 1 1 , 4 0 0 1 8 159 8 1 0 8 1 2 5 7 0 9 Q6 0 0 1 2 140 9 1 3 5 1386 0 9 9 , 7 0 0 1 5 1 5 4 1 0 3 4 3 1 6 4 7 1 1 0 2 0 , 8 <0,1 0 , 3 3 4 1 6 5 7 8 7 1 7 9 7 3 1 0 4 , 8 0,1 3 , 4 9 180 1 0 3 8 8 1719 0 1 0 2 2 , 6 0 0 39 1 7 2 1 0 3 8 9 1 6 1 5 0 1 0 24,1 0 0 39 1 6 2 1 0 5 0 1 7 4 0 0 1 0 2 , 9 0 0 5 1 7 4 7 8 7 1 4 5 5 3 8 6 , 0 0 , 2 3 , 4 11 1 8 2 9 2 6 8 1 4 4 8 0:; :9. . 1 8 , 5 0 0 3 0 161 9 4 9 1541 0 9 3 , 2 0 0 5 171