H1415 chromtech

H15. Chromatografische

technieken

PW6 week 5 les 2

swlom2b / swlov2a L. Fassotte

HW voor deze les: afmaken hoofdstuk 14 (t/m

31)

Chromatografie principes

(Hoofdstuk 14)

adsorptie

verdeling

ionenwisseling (lading)

molecuulgrootte (gelpermeatie)

Uitvoeringsvormen

(Hoofdstuk 15)



Papierchromatografie



Dunnelaag chromatografie



Kolom (vloeistof) chromatografie

Gaschromatografie

[1] Papierchromatografie

 _{Scheiding op basis van:}

 _{oplosbaarheid in het eluens}

 _{aanhechtingsvermogen aan het papier (water in} cellulose)

 _{Principe: verdelingschromatografie}

 _{Alleen kwalitatief (identificatie)}

 Uitvoeringsvormen:

 Stijgende papierchromatografie  _{Dalende papierchromatografie}  _{Circulaire papierchromatografie}

[1] Papierchromatografie

[2] Dunnelaag

chromatografie

 _{In plaats van papier:}

 _{cellulosekorrels op drager van kunststof of}

aluminiumfolie

 _{aluminiumoxide of silicagel}

 _{Principe: verdelingschromatografie}

 _{Kwalitatief (identificatie) en kwantitatief (concentraties)}

 Snellere elutie en betere scheiding  _{TLC: thin layer chromatography}

 _{HPTLC: high performance thin layer}

[3] Kolomchromatografie

 Vloeistofchromatografie: mobiele fase is

vloeistof

 Verschillende technieken:

 Gelfiltratie (molecuulgrootte)  Ionenwisseling (lading)

[4]

Hogedruk-vloeistofchromatografie (HPLC)

 Vloeistofchromatografie: mobiele fase is

vloeistof

 Normale vloeistofchromatografie: deeltjes

van ± 100  μm

 HPLC: zeer kleine korreltjes: 5-10 μm

 Hoge druk nodig, bijv. 30 MPa (300 x

atmosferische druk)

 High pressure / High performance Liquid

[4]

Hogedruk-vloeistofchromatografie (HPLC)



Detectoren:

 Ultraviolet detector (emissie bij bijv. 254

nm)

 Brekingsindex detector

 Elektrochemische detector (geleiding /

potentiaal)

[5] Gaschromatografie (GC)

 vloeistofmonster dat onmiddellijk verdampt  gasmonster (headspace)

[5] Gaschromatografie (GC)



Detectoren:

 TCD: thermische geleidingsdetector  FID: vlamionisatie detector

Theorie

 Doel chromatografie:

 Identificatie (kwalitatief)  Concentratie (kwantitatief)

 Chromatogram: afbeelding of grafische

weergave

 Een goed chromatogram:

 Scherpe pieken (smal)

Theorie: retentie

 t_M: dode tijd, retentietijd v.d. mobiele fase

(luchtpiek)

 t_R: bruto retentietijd component

Theorie: resolutie

 Resolutie = oplossend vermogen

 Hoe goed de pieken gescheiden zijn

 R=

 t_R is het verschil tussen de retentietijden van

comp. 1 en 2

 gem. w is de gemiddelde piekbreedte van

comp. 1 en 2

 Opgave 9 en 10   

Theorie: schoteltheorie

 Uitwisseling van componenten tussen de

stationaire en de mobiele fase

 Schotels: denkbeeldige plaatsen waar

evenwicht is tussen de concentraties in de mobiele fase en de stationaire fase

 De term komt uit de industrie (destillatie

Theorie: schoteltheorie

 Aantal theoretische schotels: N = 16 x

(t_R/w_b)2

 t_R is brutoretentietijd

 w_b is piekbreedte aan de basis

 Schotelhoogte: H = L/N (mm)

 L = lengte kolom (mm)

 N = aantal theoretische schotels

 Schotelhoogte klein → scheidend vermogen